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Tris中文品名為三羥;氨基;緩血酸胺;2-氨基-2-(羥)-1,3-丙二醇。是一種白Chemicalbook色結(jié)晶或粉末。溶于乙醇和水,微溶于、苯,不溶于、,對(duì)銅、鋁有腐蝕作用,有刺激性的化學(xué)物質(zhì)。緩沖特性Tris為弱堿,在25℃下,它的pKa為8.1;根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。TrisChemicalbook堿的水溶液pH在10.5左右,一般加入鹽酸以調(diào)節(jié)pH值至所需值,即可獲得該pH值的緩沖液。但同時(shí)應(yīng)注意溫度對(duì)于Tris的pKa的影響。
TE緩沖液 Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”,TE緩沖液是弱堿性,對(duì)DNA的堿基有保護(hù)性,因此,DNA在TE中的穩(wěn)定性較好,不易被破壞完整性或產(chǎn)生開環(huán)及斷裂,TE緩沖液被用于DNA的穩(wěn)定和儲(chǔ)存。
將調(diào)節(jié)pH值的酸溶液換成,則獲得“TAE緩沖液”(Tris/Acetate/EDTA),TAE是使用廣泛的緩沖系統(tǒng)。其特點(diǎn)是超螺旋在其中電泳時(shí)更符合實(shí)際相對(duì)分子質(zhì)量,且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率也較快,電泳大于13kb的片段時(shí)用TAE緩沖液將取得更好的分離效果。
許多緩沖液中含有NaCl,以幫助保持蛋白的可溶性和模擬生理?xiàng)l件。一般常用150 mM的NaCl。
在不同的蛋白純化步驟中,可能需要改變鹽離子的濃度。例如,如果是通過離子交換層析進(jìn)行蛋白純化,一開始需要降低鹽離子的濃度(5~25mM)避免高離子強(qiáng)度和蛋白競(jìng)爭(zhēng)和填料結(jié)合,這樣可防止蛋白從離子交換柱中流穿,從而使柱子能夠結(jié)合目的蛋白,洗脫除去雜蛋白。