生物緩沖液Tris是一種氨基獨一不含鈉的氨基緩沖堿，不會給體系中帶入鈉、鉀離子，不影響滲透壓，必要時也可以加入生理鹽水調(diào)節(jié)鹽平衡。其對生物化學(xué)過程的影響很小，也不會與鈣、酶及重金屬離子生成沉淀，不影響激酶、磷酸酶、脫氫酶等多種酶的活性。通常用于DNA、RNA及蛋白質(zhì)相關(guān)的實驗，常用緩沖體系有：Tris-HCl緩沖液、TBS緩沖液、TE緩沖液、TAE緩沖液、TBE緩沖液、Tris甘氨酸緩沖液、Tris磷酸緩沖液等。需要注意的是Tris的pH值受溫度影響較大，要注意控制好溫度；Tris溶液顯堿性，會吸收CO2，要注意密封。

02、緩沖溶液的選擇與計算

為了保證緩沖溶液有足夠強的緩沖能力，在配制緩沖溶液時，需要做到：

為使共軛酸堿對的濃度比接近于1，應(yīng)根據(jù)所需要維持的pH范圍選擇合適的緩沖對，使其中的弱酸的PKa等于或接近于所要求的pH。

例如，生物培養(yǎng)液中需用PH=7.0的緩沖溶液，已知H2PO4-的pKa2=7.21，因此，H2PO4—HPO42-是可以選擇的合適的緩沖對。如若配制PH=9.0的緩沖溶液，則可選擇NH3·H2O-NH4Cl緩沖對（pKa（NH4 ）=9.25）。

一旦確定了緩沖液的pH值，就需要選擇使用什么樣的緩沖體系。首先是在選擇緩沖體系時要確保選擇的緩沖體系在你設(shè)定的pH值上確實具有緩沖能力。選擇的緩沖體系，其解離常數(shù)pKa值應(yīng)該在設(shè)定的pH上下一個pH值單位內(nèi)。

     再者是確保你使用的緩沖液濃度足夠高以達(dá)到實際緩沖溶液的作用，正常一般選擇的濃度是20~100mM。需要記住的是你所使用的緩沖體系不應(yīng)該影響蛋白活性！例如，磷酸鹽會抑制激酶的活性，所以反應(yīng)前應(yīng)徹底地透析掉。