固相萃取柱的填料

固相萃取填料通常是色譜吸附劑，大致可以分為三大類，分別是以硅膠、高聚物、無機(jī)材料為基質(zhì)。

一類是以硅膠為基質(zhì)，如：Waters Sep-Pak C18固相萃取小柱，硅膠極性很強(qiáng)，呈弱酸性,可被用于正相或反相兩種分離模式：正相提取時(shí)，極性比硅膠弱，反相提取時(shí)非極性比C18 或 C8 的弱。對(duì)于類固醇有著較好的萃取效果通常用于非極性或弱極性化合物的萃取或極性雜質(zhì)的去除。主要用于血樣、尿樣中藥品及其代謝物、多肽脫鹽、環(huán)境樣品中的痕量有機(jī)化合物富集、飲料中的有機(jī)酸。

第二類是以高聚物為基質(zhì)，如：聚乙烯-二乙烯苯等。高純度、高交聯(lián)度的乙烯-二乙烯基苯聚合物為固定相填裝的萃取小柱具有高載樣量，可耐受極端 pH 條件和不同的溶劑，對(duì)極性化合物具有優(yōu)異的保留能力?？捎米魉嵝缘?、中性的和堿性化合物的通用型吸附劑，通常用于反相條件下保留含有親水基團(tuán)的疏水性化合物如：酚類、硝基芳香類等。

第三類是以無機(jī)材料為主的，如：弗羅里硅藻土、氧化鋁、石墨化碳等。弗羅里硅土是一種氧化鎂復(fù)合的極性硅膠吸附劑，以此為基質(zhì)的萃取小柱適合于從非極性基質(zhì)中吸附極性化合物，如多多環(huán)芳烴、有機(jī)氯農(nóng)殘等；石墨化碳黑（CARB）萃取小柱, 以石墨化碳黑為填料，萃取過程非常迅速。且對(duì)化合物的吸附容量比硅膠大一倍有余，由于石墨化碳黑表面的正六元環(huán)結(jié)構(gòu)，使其對(duì)平面分子有極強(qiáng)的親和力，非常適用于很多有機(jī)物的萃取和凈化，尤其適于分離或去除各類基質(zhì)如水果、蔬菜中的色素、甾醇等物質(zhì)；以氧化鋁為基質(zhì)的填料有酸、堿、中性三種類型，適用于酸性、堿性的、中性溶劑的分離萃取。

固相萃取柱回收率低的原因及解決方法

固相萃取柱回收率低：

（1）可能原因：柱活化條件不恰當(dāng)

解決方法：

根據(jù)固定相的不同，正確活化SPE小柱，反相填料，正相填料，離子交換填料：

（2）可能原因：樣品溶劑對(duì)目標(biāo)成分的作用力比固定相強(qiáng)

選擇對(duì)目標(biāo)成分具有更強(qiáng)選擇性的SPE小柱

調(diào)整樣品溶劑的pH值，增加目標(biāo)成分在固定相上的作用力

改變樣品溶劑的極性，降低目標(biāo)成分在溶劑中的作用力

使用固相萃取柱時(shí)應(yīng)注意的影響因素

溶劑的選擇

在固相萃取中，萃取固定相的活化、上樣富集、淋洗雜質(zhì)、分析物洗脫的過程中，都涉及溶劑的選擇問題。溶劑選擇重要的是溶劑強(qiáng)度，這是保證固相萃取成功的關(guān)鍵表2給出了常見正相型和反相型固相萃取中溶劑的極性和強(qiáng)度大小關(guān)系。

對(duì)于固定相活化溶劑，一般先使用強(qiáng)的溶劑去除固定相上的雜質(zhì)，然后選擇與上樣溶劑強(qiáng)度一致的活化溶劑，以保證樣品能夠在固定相上充分保留。需注意的是，固定相在活化過程和活化結(jié)束后都要保持濕潤(rùn)，否則會(huì)使固定相干裂或者進(jìn)入氣泡，導(dǎo)致柱效降低、回收率降低以及重現(xiàn)性變差。

對(duì)于上樣溶劑的選擇，要盡可能選擇弱強(qiáng)度的溶劑，保證樣品能夠充分地保留在固相萃取柱上，還可以采用大量上樣方法，提高富集倍數(shù)。如果上樣溶劑強(qiáng)度過高，樣品不能保留或者弱保留，則回收率低。

對(duì)于洗脫溶劑，要選擇溶劑強(qiáng)度比較大的，保證保留在固定相上的樣品洗脫下來，對(duì)大多數(shù)化合物來說，是一種比甲、乙醇更好的洗脫溶劑。另外，選擇的洗脫溶劑要與后續(xù)的分析條件相適應(yīng)。還有就是要選擇黏度小、純度高、毒性小并且不與樣品和固定相發(fā)生反應(yīng)以及不會(huì)干擾樣品后續(xù)檢測(cè)的溶劑。如果單一的洗脫溶劑效果不理想，也可考慮使用混合溶劑進(jìn)行洗脫。