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排氣泡注意事項(xiàng)

排泡時(shí)，一般排除1/3柱體體積的溶劑即可排除填充物中的氣泡，切記不可將溶液排干。防脫水，手動(dòng)排氣泡速度不易過(guò)快，但也不能過(guò)慢，過(guò)慢的速度可能無(wú)法排出較大的氣泡。

要是激1活平衡液不小心排干了怎么辦？只需再加入活化溶劑，使之成為氣泡。

適當(dāng)?shù)嘏懦龤馀菘梢栽谝欢ǔ潭壬媳苊膺^(guò)慢或流速不穩(wěn)定的情況。那么我們的恢復(fù)，平衡性能不能得到保證？有一種神奇的小操作，就是在做完這兩個(gè)步驟后抽干，這樣我們就可以得到更好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

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固相萃取(Solid Phase Extraction，簡(jiǎn)稱(chēng) SPE)是20世紀(jì)70年代中期發(fā)展起來(lái)的樣品前處理技術(shù)，其用途廣泛，并日益受到人們的歡迎。按其不同的吸附填料和吸附機(jī)理，主要分為正相、反相、離子交換和混合固相萃取小柱。正相、反相固相萃取小柱主要用于萃取極性和非極性化合物，而對(duì)某些帶電物質(zhì)(離子化合物)的萃取回收率較低，例如C18固相萃取小柱，當(dāng)目標(biāo)化合物處于離子狀態(tài)時(shí)，C18對(duì)該化合物的能力因子顯著降低。

離子化固相萃取技術(shù)適合于分解為帶電離子的化合物，其作用機(jī)制是在帶電的目標(biāo)化合物離子和帶電離子相反的吸附劑之間產(chǎn)生靜電吸引。試樣基質(zhì)可以是極性的，例如水溶液，也可以是非極性的有機(jī)溶液，但實(shí)際使用時(shí)用水溶液較多，如生物體液、江河湖海等天然水、廢水等。

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反相萃取分離主要是利用固相萃取材料官能團(tuán)與目標(biāo)化合物碳?xì)滏I之間的非極性作用力。反相非極性的 SPE柱通常更適合從極性基質(zhì)中提取分離出非極性和中等極性的目標(biāo)化合物。對(duì)利用非極性作用力吸附于非極性 SPE柱的目標(biāo)化合物，可用氯i仿、環(huán)i己烷、乙i酸乙i酯等具有非極性的溶劑洗脫。當(dāng)溶劑的洗脫強(qiáng)度足夠大，可以使目標(biāo)化合物與吸附劑非極性基團(tuán)間的范德華力不受影響時(shí)，使其在 SPE柱中順利洗脫。即使是極性更強(qiáng)的甲i醇，對(duì)許多化合物而言，也有足夠的非極性力量來(lái)洗脫它。有時(shí)候，單種溶劑無(wú)法完全洗脫疏水性的目標(biāo)化合物，可以考慮使用二氯甲i烷：乙i酸乙i酯(1:1，體積比)。

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對(duì)典型的硅膠基質(zhì)鍵合反相柱體，在不使用緩沖液的情況下，建議采用下列清洗溶劑系列：甲i醇---乙晴---75%乙晴/25%異丙i醇---異丙i醇---二氯甲i烷---己烷；每種溶劑至少?zèng)_洗10個(gè)柱體，分析柱的洗滌流速為250 mm×4.6 mm。zui終以10柱體積異丙i醇過(guò)渡，然后返回到原始流動(dòng)相(不含緩沖鹽)，zui后返回到初始流動(dòng)相配置。如使用紫外檢測(cè)器，則應(yīng)避免選擇在紫外區(qū)域有吸收作用的溶劑，否則需要使用大量的溶劑沖洗基線(xiàn)，以使基線(xiàn)穩(wěn)定。四氫呋i喃也是常用的清潔溶劑。如懷疑柱子受到嚴(yán)重污染，也可用二甲亞砜(DMSO)或二甲i基胺與水按50:50的比例混合，用流速低于0.5 ml/min的水沖洗色譜柱。

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SPE小柱和色譜柱之間的一個(gè)區(qū)別是， SPE是一次性消耗品，在耐受溶劑范圍之外，短時(shí)間的溶劑洗滌對(duì)小柱的保留特性幾乎沒(méi)有影響，而且不會(huì)造成保留的顯著差異，因此它使用的 pH值范圍較寬，一般可在pH值范圍1-10之間使用，而不會(huì)造成結(jié)果的差異。

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固相萃取(Solid Phase Extraction，簡(jiǎn)稱(chēng) SPE)是一種將選擇性保留、選擇性洗脫等過(guò)程結(jié)合在一起的分離技術(shù)。

在通過(guò)吸附劑(Sorbent)處理復(fù)雜樣品時(shí)，吸附劑通過(guò)極性作用、疏水作用或離子交換等作用力，選擇性地保留了目標(biāo)物質(zhì)(Aimed Compound)和少量與目標(biāo)物質(zhì)性質(zhì)相似的組分，而其它組分則通過(guò)吸附劑流出小柱，然后以另一種溶劑體系選擇性地洗脫目標(biāo)物質(zhì)，實(shí)現(xiàn)了目標(biāo)物質(zhì)的分離、提純和富集。

固相萃取過(guò)程中，“保留”和“洗脫”都受到目標(biāo)物、吸附劑和溶劑三個(gè)因素的影響，對(duì)于給定的目標(biāo)物，選擇合適的吸附劑、樣品溶劑和洗脫溶劑是成功分離的關(guān)鍵。

固相萃取術(shù)語(yǔ)通用：

吸附劑：固相萃取柱中的一種填料，它能選擇性地從樣品溶液中萃取某些化合物；

吸收能力(Capacity)：一定質(zhì)量的吸附劑，在特定條件下，能保持化合物的總質(zhì)量(包括目標(biāo)化合物和部分干擾化合物)。

固體萃取塔：固相萃取柱(Solid Phase Extraction Column，簡(jiǎn)稱(chēng) SPE柱)是由層析柱發(fā)展而來(lái)的樣品前處理設(shè)備，用于萃取、分離和濃縮。本發(fā)明主要用于各種食品、農(nóng)畜產(chǎn)品、環(huán)境和生物樣品中的樣品預(yù)處理。固相萃取技術(shù)已廣泛應(yīng)用于眾多國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T)和工業(yè)分析標(biāo)準(zhǔn)。

固相萃取柱的選擇必須考慮柱容量。因?yàn)槲覀兠鎸?duì)的樣品基質(zhì)一般比較復(fù)雜，比如食物，生物樣品等等。固相萃取中，固相萃取吸附劑在吸附目標(biāo)化合物的同時(shí)，也吸附具有類(lèi)似性質(zhì)的雜質(zhì)。所以，考慮柱容是指目標(biāo)化合物加可吸附的雜質(zhì)總量不能超過(guò)柱容。結(jié)果表明，當(dāng)載樣時(shí)，部分目標(biāo)化合物可能無(wú)法被吸附，從而降低了回收率。