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廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司主營(yíng):Gemini色譜柱,Synergi色譜柱,Luna色譜柱,美國(guó)飛諾美色譜柱,Phenomenex色譜柱等等。我們不斷追求,通過(guò)自身的不斷完善,可以為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)需要的化學(xué)試劑、玻璃儀器、實(shí)驗(yàn)器材和生物耗材,是全方面的實(shí)驗(yàn)室一體化采購(gòu)平臺(tái)。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神,為您提供價(jià)格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時(shí)的送貨服務(wù),準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。硅膠基質(zhì)-pH2-8------------------高或低pH下,硅膠會(huì)溶解2。創(chuàng)業(yè)的路上我們風(fēng)雨同舟,一份耕耘就有一份收獲
液相色譜柱清洗方法
gao效液相色譜是20世紀(jì)60年代后期發(fā)展起來(lái)的分離分析技術(shù),是現(xiàn)代分離測(cè)定的重要手段。問(wèn)世以來(lái),因其具有分離效能高、分析速度快、檢測(cè)靈敏度好、能分析高沸點(diǎn)但不能氣化的熱不穩(wěn)定生理活性物質(zhì)的特點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、及臨床分析。gao效液相色譜柱是消耗品,會(huì)隨使用時(shí)間或進(jìn)樣的次數(shù)增加,出現(xiàn)色譜峰高降低,峰寬加大或出現(xiàn)肩峰,柱效下降。曾經(jīng)也有很多同學(xué)和我聯(lián)系討論色譜柱的清洗和再生,所以我之前寫了一篇關(guān)于色譜柱的清洗欠你們的色譜柱清洗再生方法來(lái)了)。需要定期進(jìn)行徹底清洗和再生,不同的色譜柱清洗方法各不相同比如:
1、反相色譜柱
分別用jia醇:水=90:10,純jia醇(HPLC級(jí)),異bing醇(HPLC級(jí)),二氯jia烷(HPLC級(jí))等溶劑作為流動(dòng)相,依次沖洗,每種流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的色譜柱體積.然后再以相反的次序沖洗。
2、正相色譜柱
分別用正己烷(HPLC級(jí)),異bing醇(HPLC級(jí)),二氯jia烷(HPLC級(jí)),jia醇(HPLC級(jí))等溶劑做流動(dòng)相,順次沖洗,每種流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的柱體積(異bing醇粘度大,可降低流速,避免壓力過(guò)高).注意使用溶劑的次序不要顛倒,用jia醇沖洗完后,再以相反的次序沖洗至正己烷,所有的流動(dòng)相必須嚴(yán)格脫水。新型配體交換手性柱分為涂敷型和鍵合型兩類,非常適合于對(duì)各類氨基酸、羥基酸及氨基醇類化合物的手性拆分,具有分離度高,柱效穩(wěn)定等特點(diǎn)。
3、離子交換色譜柱
長(zhǎng)時(shí)間在緩沖溶液中使用和進(jìn)樣,將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力下降,用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽(yáng)離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。
另外,還可以選擇能溶解柱內(nèi)污染物的溶劑為流動(dòng)相做正方向和反方向沖洗。但再生后的色譜柱柱效是不可能恢復(fù)到新柱的水平的.如果柱子裝反了,可以調(diào)回來(lái),但可能會(huì)造成柱內(nèi)擔(dān)體塌陷.在不得已的情況下盡量不要反裝色譜柱。
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完整的手性分離方案
從分析到制備級(jí)別,簡(jiǎn)化手性分離,均是明智的投入!
LUX手性柱和填料通過(guò)以下三種方法簡(jiǎn)化分離過(guò)程:
?獨(dú)特和傳統(tǒng)的固定相相結(jié)合,增加手性篩選的成功率
?完全兼容于正相體系、極性有機(jī)相體系、超臨界流體
?色譜及反相體系的方法-無(wú)需換柱!
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現(xiàn)有5種獨(dú)特的固定相可選擇!
1.Amylose-2:獨(dú)特的氯代固定相擴(kuò)大了對(duì)映體選擇性范圍;
2.Cellulose-2:新型氯代固定相提高您手性篩選的成功率;
廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2005年,位于廣州番禺區(qū),是集技術(shù)和銷售于一體的企業(yè)。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國(guó)紐約留學(xué),歸國(guó)創(chuàng)立了聯(lián)方。中西結(jié)合的管理理念,自強(qiáng)不息、開(kāi)拓進(jìn)取、勤勉擔(dān)當(dāng),致力于把聯(lián)方打造成一個(gè)百年品牌、一個(gè)z專業(yè)的一站式實(shí)驗(yàn)室采購(gòu)平臺(tái),追求質(zhì)量、追求服務(wù)、追求和創(chuàng)新??茖W(xué)化、精細(xì)化、專業(yè)化。服務(wù)理念:我們有著專業(yè)的銷售及售后服務(wù)團(tuán)隊(duì),可以為您提供實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的整套方案、有著的售前與盡心的售后服務(wù)和技術(shù)支持。我們不斷追求,通過(guò)自身的不斷完善,可以為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、實(shí)驗(yàn)器材、色譜耗材和生物耗材,是的實(shí)驗(yàn)室一體化采購(gòu)平臺(tái)。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神,為您提供價(jià)格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。同樣道理,色譜柱一段時(shí)間不用后,也應(yīng)該按照第4條,進(jìn)行小流速的沖洗色譜柱。 我們有及時(shí)的送貨服務(wù),準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。公司主營(yíng):Luna色譜柱,美國(guó)飛諾美色譜柱,Phenomenex色譜柱,手性色譜柱,Lux多糖類手性色譜柱等等
液相色譜柱使用問(wèn)題解析
1對(duì)于一根常用的C18柱,拿到一根新柱的時(shí)候應(yīng)該怎樣進(jìn)行活化及維護(hù)?為什么要這樣做?
答:新柱活化,實(shí)際上是一個(gè)平衡的過(guò)程,除了用流動(dòng)相平衡外,有時(shí)候還必須用所測(cè)樣品對(duì)新柱進(jìn)行平衡,特別是測(cè)定分子量比較高的多肽,尤其重要。因?yàn)榉肿恿扛叩奈镔|(zhì)分子,擴(kuò)散速度慢,平衡所需時(shí)間也相應(yīng)較長(zhǎng)。具體平衡方式也很簡(jiǎn)單,多進(jìn)幾次樣品,直到峰面積和保留時(shí)間穩(wěn)定,再進(jìn)行正式進(jìn)樣測(cè)定。反相色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng),通常為水,緩沖液與jia醇,已腈等混合物。
如果要加快平衡時(shí)間,把前面用來(lái)平衡的進(jìn)樣樣品濃度加大,或者不等洗脫完成,連續(xù)進(jìn)樣多針。用待測(cè)物對(duì)新柱平衡,目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點(diǎn)的吸附能力飽和掉。
2測(cè)定多肽,一般采用什么柱子?流動(dòng)相是yi腈和水,還有微量的TFA。特別是像類似三肽的短肽,應(yīng)該怎么選擇柱子?
答:分子量不高的多肽一般選用常規(guī)C18柱就能測(cè)定,也有用離子交換柱、水性C18柱和Hilic親水作用柱的。
廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司主營(yíng):Kinetex色譜柱,Gemini色譜柱,Synergi色譜柱,Luna色譜柱,美國(guó)飛諾美色譜柱等等,我司對(duì)于所銷售的產(chǎn)品,都有嚴(yán)格的管理控制體系。我們一直堅(jiān)持以合理的價(jià)格,銷售質(zhì)量好的產(chǎn)品為宗旨,對(duì)于進(jìn)貨產(chǎn)品嚴(yán)格把關(guān),每到貨一批玻璃產(chǎn)品,我們均抽樣檢定,拒接任何、有瑕疵的產(chǎn)品;耗材方面,我們會(huì)注重對(duì)廠家的各項(xiàng)考核,包括產(chǎn)品的檢驗(yàn),廠家資質(zhì)的審驗(yàn),廠家工廠的考察;5的范圍內(nèi)使用,而離子交換色譜要求有更寬的pH范圍,因此其基質(zhì)現(xiàn)在仍主要使用聚ben乙烯和二乙烯ben。標(biāo)準(zhǔn)品方面,我們會(huì)檢驗(yàn)每一批產(chǎn)品的批次,質(zhì)檢報(bào)告或者證書,并選擇一些在我們的客戶群里口碑比較好的品牌合作。
提高液相色譜柱柱效的方法
(1)降低移動(dòng)相的流速,但會(huì)使分析時(shí)間延長(zhǎng)。
(2)減少固定相的量,但色譜柱中樣品的負(fù)載量也隨之減小。
(3)減小固定相的顆粒度,但不能過(guò)分,過(guò)分后色譜柱的滲透率也會(huì)減小。
(4)選用低粘度的移動(dòng)相,以利于快速傳質(zhì),但卻不利于多組份分析。
(5)適當(dāng)提高柱溫,可降低移動(dòng)相的粘度,但柱效和分離度也隨之降低。
(6)盡量減小停滯移動(dòng)相的體積,但卻加快了移動(dòng)相的流速。
對(duì)柱效值進(jìn)行跟蹤測(cè)算應(yīng)注意的問(wèn)題
我們也應(yīng)記住柱效值并不足以預(yù)測(cè)在所有條件下的柱性能,對(duì)大多數(shù)色譜工作者來(lái)說(shuō),柱性能指的是色譜柱用于特定分離的能力,而僅僅有高柱效并不能保證這種分離能力。
不管用什么特定的測(cè)試方法,都會(huì)有幾個(gè)參數(shù)影響柱效的測(cè)定。這些參數(shù)包括:洗脫液的成分和粘度及其線流速,測(cè)定塔板數(shù)所用的溶質(zhì),溫度,柱長(zhǎng),填料裝填方式,顆粒度,還有所選用的測(cè)量和計(jì)算方法。而測(cè)量和計(jì)算方法對(duì)柱效值的確定起著極大的作用。
廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2005年,位于廣州番禺區(qū),是集技術(shù)和銷售于一體的企業(yè)。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國(guó)紐約留學(xué),歸國(guó)創(chuàng)立了聯(lián)方。公司主營(yíng):液相色譜柱,Kinetex色譜柱,Gemini色譜柱,Synergi色譜柱,Luna色譜柱等等。我們的服務(wù)范圍:1、 亞速旺廣州代理。2、 美國(guó)精騏有限公司廣州一級(jí)代理。7μm色譜柱高20%在HPLC和UHPLC系統(tǒng)上實(shí)現(xiàn)亞2μm級(jí)性能立即改善您需要3。3、 丹麥CAPP、波蘭RADWAG合作伙伴。4、 博納艾杰爾、美國(guó)飛諾美Phenomenex廣東代理。5、 代理環(huán)凱、BD、梅里埃等微生物試劑。6、 提供國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口的玻璃、色譜耗材,3M、杜邦等防護(hù)產(chǎn)品。7、 代理中檢所、計(jì)量院、USP、TRC、DR、ES、Bepure、first standard。8、 定制各種實(shí)驗(yàn)分析檢測(cè)玻璃裝置,定制各種實(shí)驗(yàn)異形裝置。
Synergi選擇性液相色譜柱
與其他極性基團(tuán)修飾的 C18 色譜柱相比,Synergi Fusion-RP 的 MS 柱流失可忽略不計(jì)
所有色譜柱的條件:
規(guī)格: 150 x 4.6mm
流動(dòng)相: A:0.1% CH3
COOH 的水溶液
B:0.1% CH3
COOH 的jia醇溶液
梯度: 在 8 分鐘內(nèi)從 95:5 (A/B) 線性變成
5:95,保持 5 分鐘
流速: 0.5mL/min
檢測(cè): Bruker-Daltonics Esquire 2000 IT
離子源:ESI
掃描速率:13000m/z/s
掃描范圍:50-1000
手性色譜柱知識(shí)介紹
由于形成包合物速度較慢,因此可能導(dǎo)致色譜峰峰形較差,同樣也影響了其在制備色譜中的應(yīng)用。環(huán)糊精固定相的選擇性取決分析物的分子大??;α-環(huán)糊精只能允許單ben基或萘基進(jìn)入,β-環(huán)糊精允許萘基及多取代的ben基進(jìn)入,γ-環(huán)糊精僅用于大分子萜類。β-環(huán)糊精手性固定相應(yīng)用范圍廣。Ibuprofen通過(guò)β-環(huán)糊精色譜柱得到分離,說(shuō)明了pH值對(duì)氫鍵的影響。當(dāng)流動(dòng)相的pH=7時(shí),觀察不到拆分的跡象。高含碳量進(jìn)步柱容量、分辨率及分析時(shí)間,用于要求高分離度的復(fù)雜樣品。pH=4時(shí),可達(dá)到好的分離效果。通常分離氨基酸時(shí),常采用低的pH值,以抑制酸性基團(tuán)的離子化,同時(shí)也增強(qiáng)氨基的質(zhì)子化。磷酸三乙胺鹽、yi酸三乙胺鹽證明對(duì)β-環(huán)糊精色譜柱來(lái)說(shuō)是很好的緩沖液。通常緩沖液是0.1%三乙胺溶液,用磷酸或醋酸調(diào)節(jié)到合適的pH值。高的流速會(huì)降低形成復(fù)合物的能力,低流速分離效果較好,0.5-1ml/min的流速z好。另外,增加緩沖液的濃度可以克服流速的影響,因?yàn)樗梢栽黾迎h(huán)糊精洞穴和流動(dòng)相的吸引力