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1.人ELISA試劑盒在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的antibody或抗原)與固相載體表面的抗原或antibody起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原antibody復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。
2.再加入酶標(biāo)記的抗原或antibody,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
3.加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析?! ?
4.由于酶的催化效率很高,間接地放大了免1疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定antibody?! ?
5.然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
細(xì)胞增殖是生活1細(xì)胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細(xì)胞的增殖是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。
越來(lái)越多的研究者們已經(jīng)把目光集中到了細(xì)胞增殖檢測(cè),關(guān)于細(xì)胞增殖檢測(cè)的方法也在不斷更新。那么到目前為止,研究細(xì)胞增殖有哪些手段呢?
細(xì)胞增殖檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞健康程度、遺傳毒性及抗腫1瘤medicine效果的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)手段。準(zhǔn)確的檢測(cè)細(xì)胞增殖方法是BrdU法。而EdU法檢測(cè)試劑盒是Brdu方法的革命性突破。EdU試劑盒是一種嘧1啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過(guò)以上原理圖的對(duì)比,大家不難發(fā)現(xiàn),EdU法檢測(cè)細(xì)胞增殖,無(wú)須抗1體,無(wú)變性步驟,保持細(xì)胞形態(tài)和DNA完整性,是一種簡(jiǎn)單,可靠,省事的創(chuàng)新方法。
轉(zhuǎn)移RNA
轉(zhuǎn)移RNA(tRNA)在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸、解讀mRNA遺傳密碼。tRNA占細(xì)胞總RNA的10%~15%,絕大多數(shù)位于細(xì)胞質(zhì)中。tRNA由Crick于1955年提出其存在,Zamecnik和 Hoagland于1957年鑒定。
tRNA一級(jí)結(jié)構(gòu)具有以下特點(diǎn):
①是一類單鏈小分子RNA,長(zhǎng)73~95nt(共有序列76nt),沉降系數(shù)4S。
②是含稀有堿基zui多的RNA,含7-15個(gè)稀有堿基(占全部堿基的15%~20%),位于非配對(duì)區(qū)。
③5′末端堿基往往是鳥piao呤。
④3'端是CCA序列,其中的腺苷酸常稱為A76,其3’—OH是氨基酸結(jié)合位點(diǎn)。
病毒核酸提取就像'針尖上跳舞'
檢驗(yàn)的首要一步是病毒核酸提取,這也是zui危險(xiǎn)的一步,需要在專門的生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室里進(jìn)行。檢測(cè)人員要在清潔區(qū)穿戴兩套防護(hù)服、兩副乳膠手套,戴護(hù)目鏡,穿靴套,前后穿過(guò)6道門,才能到達(dá)核心實(shí)驗(yàn)區(qū),病毒核酸提取就像是“針尖上的舞蹈”?!懊看蚊撓路雷o(hù)服,衣服都濕透了。在2—4個(gè)小時(shí)的病毒核酸提取實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,一般都會(huì)安排兩人一組進(jìn)行檢驗(yàn),既是規(guī)定要求,也是防止工作人員在密閉的負(fù)壓實(shí)驗(yàn)空間里出現(xiàn)意外。