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凍存袋注意事項(xiàng)
1.欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長(zhǎng)良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。
冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否仍保有其特有性質(zhì),例如hybridoma應(yīng)在冷凍保存前一至二日測(cè)試是否有antibody之產(chǎn)生。
2.細(xì)胞在液氮中可長(zhǎng)期凍存沒(méi)有時(shí)間限制,而不會(huì)影響細(xì)胞活力﹔在-70度可保存數(shù)月。注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。
DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),無(wú)菌且無(wú)色是直接購(gòu)買(mǎi)無(wú)菌產(chǎn)品,以5~10m1小體積分裝,4℃避光保存,勿作多次解凍。
3.凍存細(xì)胞數(shù)量要足夠。無(wú)論再怎么小心,細(xì)胞在冷凍和復(fù)蘇過(guò)程中總會(huì)死掉一批的。所以,一開(kāi)始凍存細(xì)胞的數(shù)量要足夠。一般要達(dá)到5× 10^6 /毫升,一瓶不夠兩瓶湊。但是,這個(gè)不能一概而論。有些細(xì)胞,比如雜交瘤細(xì)胞,只需要1-3x 10^6 /毫升
凍存袋,可千萬(wàn)別這么用哈!
1.不要使用金屬管夾
2.不要離心
3.不要在凍存袋上直接寫(xiě)字標(biāo)識(shí)凍存細(xì)胞的信息
4.不要在凍存袋表面粘帖標(biāo)簽不推薦使用同一凍存袋多次凍融細(xì)胞
5.DMSO稀釋以后才能放進(jìn)凍存袋,DMSO濃度不要超過(guò)10%
6.復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)建議把凍存袋放在一個(gè)保護(hù)袋中進(jìn)行融化
7.不要超過(guò)凍存袋推薦的工作體積
凍存袋臨時(shí)儲(chǔ)罐
公開(kāi)了一種細(xì)胞凍存袋樣本臨時(shí)儲(chǔ)罐,儲(chǔ)罐本體設(shè)有罐體,罐蓋,凍存架儲(chǔ)存格結(jié)構(gòu),罐體和罐蓋可將儲(chǔ)罐本體形成密封腔體,罐體頂部為密封結(jié)構(gòu),罐體頂部設(shè)有圓孔,罐蓋的尺寸和圓孔的尺寸相互匹配,罐蓋可覆蓋在圓孔之上形成密封腔體,所述的凍存架儲(chǔ)存格結(jié)構(gòu)包括軸承,軸承底部設(shè)有底盤(pán),底盤(pán)上設(shè)有隔板.隔板的數(shù)量為多個(gè),多個(gè)隔板將底盤(pán)分隔為多個(gè)儲(chǔ)存格.通過(guò)設(shè)計(jì),縮小了蓋口,減少了液氮逃逸,節(jié)省成本,凍存架放置于單獨(dú)的格子里有利于凍存位置管理,達(dá)到快速取放,尤其是整體凍存架快速取放轉(zhuǎn)移的目的.