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華士特脂肪酸定量 檢測方法:
1、樣品提取
稱取適量樣品,加入4mL的1醇/CH2Cl2(1:3)混合溶液,搖勻;恒溫在30℃以下超聲抽提10min。取出離心管,放于離心機(jī)中離心(1800rpm,10min),收集上清液,重復(fù)3次;將萃取液在柔和氮?dú)饬飨麓蹈伞?
2、萃取液的皂化
加入3mL 6%KOH的1醇溶液(配制:6gKOH/1醇118mL左右),超聲10min,放置30min,重復(fù)3次,室溫放置過夜(瓶蓋蓋緊)進(jìn)行堿水解;加入2mL正己烷,超聲10min,搖勻,震蕩離心,棄除上層正己烷萃取液,重復(fù)3次。在上述萃取完剩下的溶液中(水相),加入約1mL 4N的HCl使pH<2,再用2mL正己烷萃取3次。
3、脂肪酸的衍生化
將上述萃取液,轉(zhuǎn)移到帶蓋玻璃管中,用氮?dú)獯蹈珊?,加入約2mL BF3-MeOH,玻璃管上空間沖入氮?dú)夂笊w蓋密閉,于90℃下加熱2h;待樣品冷卻后,加入5%NaCl溶液約1ml,用2ml正己烷萃取3次,并將萃取液轉(zhuǎn)移到2mL進(jìn)樣瓶中,氮?dú)獯蹈?,待分析?
4、色譜條件
色譜柱:Thermo TG-5MS 30m x 0.25mm x 0.25μm
升溫程序:80度起始溫度,保持1分鐘;10度/min升溫到200度,5度/min升溫到225度,2度/min升溫到250度,保持5min。
MS,EI源。
“華士特生物”公司成立于2011年,是一家致力于新興生物技術(shù)研發(fā)與成果轉(zhuǎn)化的創(chuàng)新、創(chuàng)業(yè)型技術(shù)企業(yè),一直專注于生命科學(xué)研發(fā)與技術(shù)服務(wù)領(lǐng)域。目前公司的主要業(yè)務(wù)包括供應(yīng)高品質(zhì)天然產(chǎn)物對照品、標(biāo)準(zhǔn)品、化合物庫等生物領(lǐng)域產(chǎn)品,以及植物激素,脂肪酸,膽汁酸,神經(jīng)酰胺,神經(jīng)遞質(zhì),微生物,植物甾醇,三萜類化合物,單寧類化合物,淀粉、多糖、木質(zhì)素、纖維素等成分定量測試及相關(guān)組學(xué)服務(wù)。
人體所需的必需脂肪酸,就是多不飽和脂肪酸,可以合成DHA(二十二碳六烯酸)、EPA(二十碳五烯酸)、AA(花生四烯酸),它們在體內(nèi)具有改善血液循環(huán)、抑制血小板凝集、阻抑動脈粥樣硬化斑塊等功效。DHA亦可提高兒童的學(xué)習(xí)技能。單不飽和脂肪酸可以降低血膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的作用。雖然不飽和脂肪酸雖然益處很多,但易產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng),因而產(chǎn)生自由基和活性氧等物質(zhì),對細(xì)胞和組織可造成一定的損傷。
華士特生物采用GC-MS的方法同時定量檢測37種脂肪酸,包括DHA、EPA、AA等多不飽和脂肪酸和其他飽和脂肪酸。歡迎咨詢送檢。