【廣告】
武漢遠(yuǎn)大弘元股份有限公司以氨基酸及其衍生物的研發(fā)、生產(chǎn)為基礎(chǔ),以武漢大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院和湖北省氨基酸工程技術(shù)研究中心的成果為依托,為客戶(hù)提供的產(chǎn)品。
天津工業(yè)生物技術(shù)研究所研究員劉君帶領(lǐng)的微生物生理和代謝工程研究組和研究員江會(huì)鋒帶領(lǐng)的新酶設(shè)計(jì)與酵母基因組工程研究組進(jìn)行合作,通過(guò)結(jié)合代謝工程和蛋白質(zhì)工程的方法,系統(tǒng)地改造大腸桿0菌,實(shí)現(xiàn)了OAH的合成。在研究中,首先比較了兩種不同來(lái)源的高絲氨酸乙酰轉(zhuǎn)移酶(MetX),然后通過(guò)敲除競(jìng)爭(zhēng)和消耗途徑基因(meta,metB和thrB)并過(guò)表達(dá)合成途徑基因(thrA,metxlm),實(shí)現(xiàn)了OAH的積累,其產(chǎn)量達(dá)到1.68 g/L。為了進(jìn)一步提高OAH的生產(chǎn),該研究采用多種代謝工程策略對(duì)工程菌株進(jìn)行進(jìn)一步改造,包括:敲除賴(lài)氨酸競(jìng)爭(zhēng)途徑基因lysA;利用啟動(dòng)子工程調(diào)控ppc表達(dá)以增強(qiáng)草酰乙0酸的供給;2012年,衛(wèi)辦監(jiān)督根據(jù)工作安排,我部正在組織修訂《食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》(GB2760-2011)。比較不同來(lái)源的天冬氨酸激酶,促進(jìn)前體天冬氨酸的合成等,使OAH的產(chǎn)量提高至4.69 g/L。然而,中間代謝產(chǎn)物高絲氨酸的大量積累說(shuō)明其下游途徑關(guān)鍵酶MetXlm的催化能力是不足的。為了解決這一問(wèn)題,該研究分別采用基于進(jìn)化保守性和基于結(jié)構(gòu)信息的蛋白質(zhì)工程策略對(duì)MetXlm進(jìn)行改造,獲得的突變體酶活比型提高了12.15倍并受到更少的反饋抑制。通過(guò)優(yōu)化表達(dá)MetXlm突變體,使工程菌株OAH產(chǎn)量達(dá)到7.37 g/L。隨后該研究通過(guò)過(guò)表達(dá)胞內(nèi)乙酰CoA合成途徑,調(diào)控胞內(nèi)NADPH的合成,進(jìn)一步提高OAH的合成能力。終獲得的工程菌株OAH-7在7.5 L發(fā)酵罐中經(jīng)60 h發(fā)酵能夠生產(chǎn)62.7 g/L的OAH,是目前報(bào)道的0高水平。
胱氨酸,因此只用于合成L-半胱氨酸的中間體。盡管L-胱氨酸和L-半胱氨酸的微生物方法生產(chǎn)日益受到人們的重視,但是由于技術(shù)原因,僅日本報(bào)道了有關(guān)微生物酶法生產(chǎn)L-胱氨酸和L-半胱氨酸的較為成熟的生產(chǎn)工藝
化學(xué)合成半胱氨酸需多步反應(yīng),產(chǎn)生DL-型外消旋體,只有經(jīng)過(guò)化學(xué)拆分才能得到所需要的L-半胱氨酸,用于L-半胱氨酸中間體的合成。
L-半胱氨酸的發(fā)酵法生產(chǎn)現(xiàn)在正處于嘗試探索階段,大規(guī)模的生產(chǎn)還受到一定條件的限制,其主要原因是因?yàn)槲⑸矬w內(nèi)的L-半胱氨酸合成過(guò)程復(fù)雜,而且合成中的關(guān)鍵問(wèn)題是一SH的來(lái)源
血同型半胱氨酸,簡(jiǎn)稱(chēng)-血同,又名Hcy。血同型半胱氨酸是一種含硫氨基酸,為蛋氨酸和半胱氨酸代謝過(guò)程中產(chǎn)生的重要中間產(chǎn)物。正常情況下,血同型半胱氨酸在體內(nèi)能被分解代謝,濃度維持在較低水平。但在日常生活中由于原發(fā)性原因和繼發(fā)性原因會(huì)影響血同型半胱氨酸代謝導(dǎo)致血同型半胱氨酸濃度堆積升高。本品如果用于銻劑中1毒的搶救應(yīng)及時(shí)足量給藥,使其最1大限度地與銻離子生成無(wú)毒性的可溶性絡(luò)合物排出體外。