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發(fā)布時間:2021-08-02 16:26  






使用時一定要根據(jù)自己的實驗需要購買提取試劑盒, 如果不是試劑盒,或許能提出RNA,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,會影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護(hù)分析、分子等后續(xù)實驗的結(jié)果。進(jìn)口的提取RNA試劑盒售價較高,單次實驗費(fèi)用花費(fèi)太大,對精度要求不高的實驗沒有必要購買,且訂貨周期長的問題(如果碰上國內(nèi)無貨的時候,要從國外發(fā)貨,會等很長一段時間)。



ELISA可用于測定抗原,也可用于測定。然而,影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個環(huán)節(jié)的才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點。

特點編輯一、、靈敏、特異的;二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;四、適用、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;五、節(jié)省實驗經(jīng)費(fèi)。



加酶標(biāo):于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“ ”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。



主要設(shè)備編輯試劑(1) 包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液):Na2CO3 1.59克NaHCO3  2.93克加蒸餾水至1000ml(2) 洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15MKH2PO4  0.2克Na2HPO4·12H2O 2.9克NaCl 8.0克KCl 0.2克Tween-20 0.05% 0.5ml加蒸餾水至1000ml(3) 稀釋液:牛白蛋白(BSA) 0.1克加洗滌緩沖液至100ml或以羊、兔等與洗滌液配成5~10%使用。



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