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培養(yǎng)容器應(yīng)該以什么速度旋轉(zhuǎn)?
這取決于細胞聚合體的直徑。當(dāng)容器轉(zhuǎn)動時,細胞聚合體加速,直到他們到達沉積速度,而該速度取決于細胞聚合體的大小。根據(jù)斯托克斯方程,沉降速率隨著細胞聚合體半徑的平方而增加。因此,隨著聚合體體積上的增加,它們沉降的更迅速,同時為了防止細胞聚合體與培養(yǎng)壁的碰撞有必要增加旋轉(zhuǎn)速度。因此,一開始可能以慢速旋轉(zhuǎn)培養(yǎng),例如7rpm,當(dāng)細胞聚合體在體積上增長并且變得可見,再增加旋轉(zhuǎn)的速度。
這是否是轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)?
轉(zhuǎn)瓶包含一個縱軸封瓶以及周圍包裹的彈性塑料壁。在這種情況下,氣體運輸是通過瓶頸。并且,轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)的目的不是三維培養(yǎng),而是二維培養(yǎng)。培養(yǎng)物沿著瓶壁生長,并且,當(dāng)瓶轉(zhuǎn)動,培養(yǎng)物就會與媒介接觸。因此,這兩個系統(tǒng)之間沒有相似性(參見問題1RCCS生物反應(yīng)器的工作原理)。
當(dāng)我想在微載體珠上培養(yǎng)細胞時,在我裝載它們進去反應(yīng)器之前細胞是否需要附在微珠?
微珠和細胞可以同時被裝載入反應(yīng)器,但又獨立彼此。在它們兩個被裝載入反應(yīng)器之后在反應(yīng)器里面的細胞就會自動地附著微珠。
使用微重力生物反應(yīng)器時需要一個恒溫箱嗎?
是的,恒溫箱是為了保持培養(yǎng)的溫度,pH值,氧氣供給量。應(yīng)當(dāng)注意水是從硅酮氧合器蒸發(fā)到恒溫箱的。這個將導(dǎo)致培養(yǎng)皿中產(chǎn)生氣泡。所以,為了保持水蒸氣的濃度,防止在培養(yǎng)容器中的蒸發(fā),恒溫箱里的濕度也是很重要的。
顛覆傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)系統(tǒng)RCCS-3D三維動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)
顛覆傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)系統(tǒng)RCCS-3D三維動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)
RCCS 是一種顛覆傳統(tǒng)的三度空間微重力培養(yǎng)系統(tǒng)。其利用培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱進行培養(yǎng),將培養(yǎng)液、細胞或組織一起加入培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱中,并去除所有氣泡。培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱安裝于具旋轉(zhuǎn)馬達之基座上,內(nèi)部組織、細胞或細胞團塊因旋轉(zhuǎn)切線力量及重力雙重影響下而保持懸浮狀態(tài)。隨著細胞或組織成長,旋轉(zhuǎn)速度可做調(diào)整,細胞形成團塊之后,必須提高轉(zhuǎn)速使其 不會沉降而碰觸底部。旋轉(zhuǎn)的目的是要讓所有細胞均勻交換養(yǎng)分和氣體,并且細胞和細胞之間可有足夠的接觸,有利于細胞聚集。另外,不論是培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱背側(cè)均具備硅膠制成的換氣膜以利進行1氣體交換,使細胞/ 組織得到充分氧氣及排除代謝后的廢氣。