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乙酰輔酶A是對(duì)脂肪酸代謝,膽固醇的生物合成以及蛋白質(zhì)乙?;彤愇煜┗陵P(guān)重要的物質(zhì)。乙酰輔酶A來自線粒體,但需要一個(gè)轉(zhuǎn)化過程,細(xì)胞漿內(nèi)負(fù)責(zé)乙酰輔酶A轉(zhuǎn)化的中心代謝酶酶是檸檬酸裂解酶(ACLY)。ACLY催化ATP依賴性檸檬酸和輔酶A(CoA)轉(zhuǎn)化為草酰和乙酰-CoA。
作為靶標(biāo),ACLY一直備受關(guān)注,許多癌細(xì)胞依賴于其增殖活性。 ACLY也是抗異常和肝脂肪變性的靶標(biāo),目前正在進(jìn)行3期臨床試驗(yàn)。已報(bào)道許多ACLY,但大多數(shù)只具有弱活性。美國哥倫比亞大學(xué)Li Tong研究組近在《自然》發(fā)表題為“An allosteric mechanism for potent inhibition of human ATP-citrate lyase”的研究,報(bào)告了一系列納摩爾級(jí)人類ACLY小分子。還通過冷凍電鏡確定了與這些之一(NDI-091143)復(fù)合的全長人ACLY同型四聚體結(jié)構(gòu),揭示了意想不到的變構(gòu)抑制機(jī)制。該變構(gòu)位點(diǎn)極大地增強(qiáng)了ACLY的“可用藥性”,代表了開發(fā)新ACLY的有吸引力靶標(biāo)。
從結(jié)構(gòu)上講檸檬酸是一種三羧酸類化合物,并因此而與其他羧酸有相似的物理和化學(xué)性質(zhì)。加熱至175 ℃時(shí)它會(huì)分化發(fā)作二氧化碳和水,剩下一些白色晶體。檸檬酸是一種較強(qiáng)的有機(jī)酸,有3個(gè)H 能夠電離; 加熱能夠分化成多種產(chǎn)物,與酸、堿、甘油等發(fā)作反響。
3-羥基丙三羧酸(檸檬酸) H3C6H5O7 的電離常數(shù)為:pk1=3.13;pk2= 4.76;pk3= 6.40,從電離常數(shù)來看,檸檬酸酸性比較強(qiáng)。的是氫離子,而檸檬酸電離后首要存在方式和PH有關(guān)。
以下化學(xué)式,依次為一、二、三級(jí)電離。
H3Cit==H H2Cit- pk1=3.13
H2Cit-==H HCit2- pk2= 4.76
HCit2-==H Cit3- pk3= 6.40
在化學(xué)鍍鎳操作的pH值條件下,絕大部分檸檬酸都已電離成三價(jià)的檸檬酸根離子。
發(fā)酵培養(yǎng)基的制備:控制好培養(yǎng)基的溫度、PH、酸度、通風(fēng)等,為了達(dá)到縮短發(fā)酵時(shí)間的目的,淀粉原料一般要經(jīng)過糖化或液化處理,來加速的生長速度。玉米(淀)粉適宜用糖化法,而薯類(淀)粉適宜用液化法。
三、提取工藝:成熟的檸檬酸發(fā)酵醪中,除含有主產(chǎn)物檸檬酸之外,還含有纖維、菌體、有機(jī)雜酸、糖、蛋白類膠體物質(zhì)、色素、礦物質(zhì)及其他代謝產(chǎn)物等雜質(zhì)。它們或來自于發(fā)酵原料、或在發(fā)酵過程中產(chǎn)生,它們或溶存或懸浮于發(fā)酵醪中。檸檬酸常用的提取工藝有鈣鹽法、萃取法、離子變化法和電滲析法等,其中鈣鹽法在我國使用較普遍。