1.一體化3D干l細(xì)胞擴(kuò)增系統(tǒng)概述

該一體化3D干l細(xì)胞擴(kuò)增系統(tǒng)是基于三維動(dòng)態(tài)灌注技術(shù)開發(fā)和制造的。是為模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長所需的生理微環(huán)境而特別設(shè)計(jì)。

該一體化3D干l細(xì)胞擴(kuò)增系統(tǒng)已經(jīng)集成了我們成熟而獨(dú)特的三維動(dòng)態(tài)灌注細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。能夠模擬生物體內(nèi)的三維微環(huán)境進(jìn)行哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。我們的生物反應(yīng)器還具有如下獨(dú)特的優(yōu)勢。

三維細(xì)胞培養(yǎng)支架技術(shù)

一體化3D干l細(xì)胞擴(kuò)增系統(tǒng)中的較大特點(diǎn)是培養(yǎng)室內(nèi)采用了三維細(xì)胞培養(yǎng)支架，此支架是運(yùn)用其專有的3D精密微制造工藝特別設(shè)計(jì)制造的。該一體化3D干l細(xì)胞擴(kuò)增系統(tǒng)已經(jīng)集成了我們成熟而獨(dú)特的三維動(dòng)態(tài)灌注細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。與一般海綿狀多孔支架材料不同，該支架具有100%的開放且相互連通的小孔，因此，細(xì)胞培養(yǎng)液可以容易地流通過支架空隙，從而消除了其他多孔支架經(jīng)常遇到的營養(yǎng)/廢物交換不暢的問題。該支架的制造材料有可生物降解和非生物降解兩種可供選擇。整個(gè)支架是由尺寸均勻的聚合物纖維構(gòu)成，相鄰層面的纖維90o垂直排列，形成了三維的100%互連的多孔結(jié)構(gòu).

life 水凝膠中細(xì)胞的固定與標(biāo)記

使用小分子物質(zhì)，例如熒光標(biāo)記 phalloidin,核酸染料，活性和毒性檢測試劑，增值檢測試劑等小分子物質(zhì)進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記方法，除了在孵育時(shí)間上適度延長以便能在水凝膠中充分?jǐn)U散外，與傳統(tǒng)的 2D 細(xì)胞培養(yǎng)方式相同。2D和3D環(huán)境下培養(yǎng)的細(xì)胞相比較，諸多生理指標(biāo)都顯著不同，例如原代小鼠乳l腺管腔上皮細(xì)胞（mammaryluminalepithelialcells,MEC）在3D基底膜基質(zhì)中增殖的時(shí)間明顯長于2D培養(yǎng)環(huán)境。所培養(yǎng)的細(xì)胞如果經(jīng)基因修飾還有熒光蛋白，則可直接用于觀測，因凝膠完全透明不影響觀測結(jié)果。如果使用抗l體等大分子對(duì)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記則不能直接在水凝膠中開展，因水凝膠的孔徑原因，不適合直接抗l體標(biāo)記，需要使用 dextranase 將細(xì)胞從水凝膠中釋放出來，如果擔(dān)心細(xì)胞在操作過程中細(xì)胞生理活動(dòng)波動(dòng)，則可經(jīng)在凝膠中將細(xì)胞固定后在進(jìn)行操作。