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傳統(tǒng)的微生物檢測實驗室采取建造緩沖間,使實驗室與外界隔離,在進行實驗操作時不受外界氣流的影響,使實驗檢測不污染。但由于室內空氣不流通,室內空氣混濁,夏季工作室內氣溫高,冬季室內氣溫低,不但對微生物工作者的身體影響較大,而且還影響實驗檢測。已設計出很有力的酶學方法用來消除一種形式的污染-使用UNG,這一技術能有效地消除由PCR產物引起的污染。近年來,室內空調的使用,造成微生物實驗室內氣流混亂,直接影響檢測結果。因此,根據衛(wèi)生防疫系統(tǒng)的業(yè)務工作要求,設計能適應無菌檢測,殺滅效果試驗,衛(wèi)生指標檢測,病原體分離鑒定,流行病分子生物研究的微生物檢測潔凈實驗室是必然趨勢,它不同于其他工業(yè)潔凈室,開展不同內容的微生物檢測工作,均有特殊的要求。我們設計的微生物潔凈實驗室,具備以下幾方面的要求。
1、潔凈室采用上送下回的氣流方式,層流罩送入100級潔凈風,環(huán)境送入1000級潔凈風,要求在層流罩隔離屏去掉情況下,工作臺面的100級潔凈度不受影響。室內頂部四周不形成氣流死角。
5、在前PCR區(qū)建立PCR混合物。
⑴可以把即刻可用的'主混合物'溶液配好、分裝并保存在-20℃或4℃,在實驗室只涉及到擴增一種或少數(shù)幾種特異序列時這樣做很有用。⑵如果你的實驗室使用多套引物,以致于配制包括所有試劑的單一反應混合物不夠經濟,可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。⑶作為一個規(guī)則,應該保存一套陰性、弱陽性和強陽性對照樣品來分析樣品配制和PCR前過程的效率和潔凈程度。潔凈室最關鍵之功效取決于操縱商品(如硅芯片等)所觸碰之空氣的潔凈度等級日及溫度濕度,使商品能在1個優(yōu)良之自然環(huán)境室內空間中生產制造、生產制造,此室內空間人們稱作潔凈室。而且,你也希望通過使用一個已知的弱陽性樣品來驗證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴增抑制物。⑷陰性樣品要與每組樣品同時做,以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產物的污染,陰性對照應該包括核酸以外的所有試劑。⑸當做陽性對照時,有兩個理由決定了應該使用少數(shù)量的核酸。⑹由于必須有對照反應,對照模板的特點應該予以考慮。