傳統(tǒng)結(jié)晶板蛋白質(zhì)晶體板比較

在20℃時(shí)雖然微流控芯片上的結(jié)晶條件數(shù)少于24孔結(jié)晶板(67 vs 94),但主要是嗜熱菌蛋白酶的結(jié)晶條件數(shù)顯著減少,其他4種蛋白在兩種方法上均有相近的結(jié)晶條件數(shù),表明微流控芯片能以接近24孔結(jié)晶板的效率進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選.但是,在4℃時(shí)微流控芯片與24孔結(jié)晶板有60%的結(jié)晶條件不同,20℃時(shí)有90%的結(jié)晶條件不同,這表明目前的這種微流控芯片還不能直接代替?zhèn)鹘y(tǒng)的24孔結(jié)晶板,它可以作為蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選時(shí)的一種補(bǔ)充方式。

蛋白結(jié)晶板

為滿(mǎn)足固相時(shí)間分辨熒光分析(TRFIA)研究需要,采用固相載體改進(jìn)技術(shù)研制用于檢測(cè)系統(tǒng)的聚微孔板,不僅提高TRFIA系統(tǒng)的靈敏度,而且可以把該技術(shù)應(yīng)用到其他分析技術(shù)、生物芯片技術(shù)、污水處理、發(fā)酵工藝、酶工程和親和層析,具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本文將聚微孔板內(nèi)表面固相功能化,研制一種在聚微孔板內(nèi)表面形成耐受強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、的尼龍-6膜層,并在膜層表面化得到活性基團(tuán)與己二酸二酰肼進(jìn)行“手臂”連接,用雙功能基團(tuán)活化,活化后的膜層與蛋白質(zhì)具有很高的連接性能和穩(wěn)定性。

蛋白結(jié)晶板使用

主要表現(xiàn)在2個(gè)方面:一是在傳統(tǒng)結(jié)晶方法和試劑基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一系列新的的結(jié)晶技術(shù)和篩選試劑盒;二是從生物學(xué),物理學(xué)和化學(xué)等角度提出的一些提高結(jié)晶篩選效率的新技術(shù),主要包括通過(guò)分子工程改造蛋白,提高蛋白溶液的穩(wěn)定和均一性,導(dǎo)入籽晶,共結(jié)晶,改善結(jié)晶界面和變溫篩選等技術(shù).展望了該領(lǐng)域未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì)。