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農(nóng)殘?jiān)噭y(cè)定樣品的處理:擦去表面泥土,剪成1cm左右見方碎片,稱取1克,放入燒杯或提取瓶中,加入5ml緩沖溶液,振蕩2min,倒出樣品溶液,靜置3min待用。對(duì)照(空白)溶液測(cè)試:于試管中加入2.5ml緩沖液,0.1ml酶液,0.1ml顯色劑,搖勻后于37℃放置15min,15min后加入0.1ml底物搖勻,立即倒入比色皿中并放入儀器比色池中進(jìn)行對(duì)照測(cè)試,測(cè)試時(shí)間以3分鐘為準(zhǔn);對(duì)照測(cè)試完后,對(duì)檢測(cè)儀進(jìn)行調(diào)“100%”。5ml,加入專用反應(yīng)瓶中,混勻靜置抑制10分鐘后,(按儀器顯示的時(shí)間計(jì)時(shí))加入顯色劑100ul,底物20ul。
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開機(jī)
插上電源,打開儀器背面綠色電源開關(guān),儀器顯示開機(jī)畫面,按畫面提示操作,按下回車鍵,儀器開始自檢,時(shí)間約1min。自檢完畢后,儀器進(jìn)入待機(jī)檢測(cè)狀態(tài)。
試劑配制緩沖液:取1包緩沖劑加入500mL蒸餾水或純凈水中,攪拌溶解制成磷酸緩沖液(pH7.6), 常溫保存。
顯色劑:取1瓶顯色劑加25mL緩沖液溶解,使用時(shí)取100μL,4℃冰箱保存。
底 物:取1瓶底物加12.5mL蒸餾水或純凈水溶解,使用時(shí)取100μL,4℃冰箱保存;或取1瓶底物加2.5mL蒸餾水或純凈水溶解 ,使用時(shí)取20μL,4℃冰箱保存。
膽dan堿酯酶:酶制劑無(wú)需配制,可直接取用,使用時(shí)取100μL,4℃冰箱保存。
樣品提取
取2g果蔬樣品(塊莖類取4g),葉菜剪成25px左右見方的碎片,塊莖類取橫截面樣品或取其表皮,放入三角瓶中,加入10mL緩沖液,振蕩1~2min ,倒出提取液,靜置2min,待測(cè)。若提取液混濁或雜質(zhì)太多可過(guò)濾后再測(cè)。
農(nóng)殘?jiān)噭┱w測(cè)定法:
1.選取有代表性的蔬菜樣品,擦去表面泥土,剪成25px左右見方碎片,取5g放入帶蓋瓶中,加入10mL純凈水或緩沖溶液,震搖50次,靜置2min以上。
2.取一片速測(cè)卡,用白色藥片沾取提取液,放置10min以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng),有條件時(shí)在37℃恒溫裝置中放置10min。預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤(rùn)。
3.將速測(cè)卡對(duì)折,用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min,使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反應(yīng)。4.每批測(cè)定應(yīng)設(shè)一個(gè)純凈水或緩沖液的空白對(duì)照卡。
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