PCR實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)設(shè)置

要完成一組PCR實(shí)驗(yàn)，通常需要經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析4個實(shí)驗(yàn)過程。

這4個實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)用房應(yīng)相鄰布置，組成一個獨(dú)立的PCR實(shí)驗(yàn)區(qū)。標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)區(qū)包括:試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)、各區(qū)配套的緩沖區(qū)及公共走廊。

PCR實(shí)驗(yàn)室整體平面布局某醫(yī)院PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局如圖1所示，整個區(qū)域有一個公用走廊，每個獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)有專門的緩沖區(qū)。通過壓差控制，使整個PCR實(shí)驗(yàn)過程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染，并且降低擴(kuò)增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。

試劑準(zhǔn)備區(qū)該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。

試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)，不得經(jīng)過其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。

試劑準(zhǔn)備區(qū)配備有2~8°C冰箱和-80°C冰箱，計(jì)算冷負(fù)荷時，需要將它們計(jì)算在內(nèi)。

房間的面積宜控制在15m2~20m2。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對正壓狀態(tài)，以防止外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入，造成污染。

標(biāo)本制備區(qū)該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定RNA時cDNA的合成。

標(biāo)本制備區(qū)配備有2~8°C冰箱和-20°C冰箱，計(jì)算冷負(fù)荷時，需要將它們計(jì)算在內(nèi)。在標(biāo)本制備區(qū)，還需要配備生物安全柜，用于進(jìn)行提取核酸的操作。

CR三區(qū)或四區(qū)的對應(yīng)的每個緩沖間，全是做成正壓嗎？

A

是的，需要做成相對正壓

PCR實(shí)驗(yàn)室的每間房間消防噴淋頭一樣要做到室內(nèi)嗎？并且做成隱形噴淋頭嗎？

是的。根據(jù)建筑消防要求，PCR實(shí)驗(yàn)室內(nèi)必須配置噴淋頭，噴淋頭按照潔凈室內(nèi)做法為暗噴淋，為保證實(shí)驗(yàn)室內(nèi)儀器的安全杜絕因煙感誤報(bào)和誤操作引起噴淋頭動作噴水。

Q

排風(fēng)口的回風(fēng)口和送風(fēng)口是一個東西嗎？只是二者的氣流方向不一樣嗎？

排風(fēng)口內(nèi)的過濾器和送風(fēng)口過濾器是一個系列產(chǎn)品，根據(jù)PCR實(shí)驗(yàn)室內(nèi)操作的實(shí)驗(yàn)不同排風(fēng)口選用過濾器或中效過濾器。

（2）嚴(yán)格把好材料質(zhì)量控制關(guān)。

在PCR實(shí)驗(yàn)室凈化施工前，首先要進(jìn)行工程招工作，在實(shí)際工作當(dāng)中，部分承包商獲取項(xiàng)目以后，為了節(jié)約費(fèi)用，獲取更多的利益，在采購材料時，有些采購人員未能按照材料設(shè)計(jì)要求（包括品種、規(guī)格、技術(shù)要求）來優(yōu)選施工材料 ；與此同時，部分采購在材料采購工作中存在收取回扣的行為，選擇劣質(zhì)的施工材料，這也是引發(fā)PCR實(shí)驗(yàn)室凈化施工質(zhì)量的原因之一。另外，部分管理企業(yè)在工程質(zhì)量管理過程中，仍未能建立完善的管理機(jī)制，允許劣質(zhì)的材料進(jìn)入現(xiàn)場和使用，從而給工程施工質(zhì)量和安全埋下一定的隱患。