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全自動核酸提取儀——磁珠法有什么特別之處?
磁珠法核酸自動提取儀是以磁珠為載體,利用磁珠在高鹽低pH值下吸附核酸,在低鹽高pH值下與核酸分離的特性,再通過移動磁珠或轉(zhuǎn)移液體來實現(xiàn)核酸的整個提取純化過程。
根據(jù)移液特點的不同,磁珠法核酸自動提取儀可分為抽吸式(也叫移液式)和磁棒式兩種類型。前者因提取時間較長,且機(jī)械臂移液的設(shè)計造成設(shè)備體積較大、成本較高等因素,無法在商業(yè)上迅速推廣。目前市場上使用較多的大部分是基于磁棒式的磁珠法核酸提取儀,也是本文介紹的重點。
如何選擇一款好用的全自動核酸提取儀?
操作簡單、上手好用
整個提取流程只有裂解-洗滌-洗脫三個步驟,中文交互式操作界面符合大多數(shù)人的使用習(xí)慣,無需專門的培訓(xùn)技術(shù)人員,即可快速提取出樣本核酸。
高通量、快速便捷
能夠一次性實現(xiàn)對96個樣本的快速處理,可在30~45 min內(nèi)完成提取工作,確保疾病爆發(fā)時進(jìn)行快速及時的應(yīng)對。
全自動核酸提取儀——類型介紹
磁珠法自動核酸提取儀又分為磁棒法和抽吸法
先說抽吸法:顧名思義,抽吸法就是通過自動移液裝置來進(jìn)行,通過自動移液裝置來加入裂解液、磁珠吸附;抽走裂解液,加入漂洗液,磁珠吸附,抽走漂洗液,加入洗脫緩沖液。從步驟上好像沒什么問題,但是抽吸法的問題在于,為了在去除廢液的時候不抽走磁珠,移液器不能靠磁珠太近,以防磁珠連同廢液被抽掉,這樣每一次抽廢液的時候總有一小部分不能完全的抽走,特別是磁鐵在底部的裝置,因為磁珠被磁鐵吸附在底部,所以移液器不能靠底部太近,這樣漂洗液就不能完全去除,殘留的漂洗液中的鹽和乙醇會影響后面的洗脫效率和PCR成功率;磁鐵在側(cè)面的裝置殘留的液體會少些,但是洗脫的效率也不好,依靠DNA自行溶解到洗脫緩沖液中,除非等上半小時以上,所以有些96自動核酸提取工作站,提取一輪的時間需要150分鐘,32磁棒法的同樣的時間可以提5輪了。
再說磁棒法核酸提取儀:通量通常有8、16、32、96通道,相對于抽吸法,磁棒法的優(yōu)點是每一步的液體不殘留,因為磁棒只帶走磁珠,轉(zhuǎn)移到下一個步驟相應(yīng)的反應(yīng)孔中,另外選擇磁棒法的提取儀器盡量要功能更齊全的,比如可以加熱,每個加熱槽獨立溫控,這樣可以設(shè)置加熱、裂解、洗脫的不同溫度,另外很重要的一點是,帶動磁棒的電機(jī)要能帶動磁棒進(jìn)行液體的快速混勻和攪拌,這樣才有利于自動化和有助于裂解和漂洗。磁棒法的通量選擇盡量是32通道,96通道的看似通量更高,但是有個很現(xiàn)實的問題,96個磁力棒在從一個板轉(zhuǎn)移至另外一個板的時候,磁力棒上面的液體中途滴下來怎么辦,它會滴到別的孔中造成污染,而32通道的磁力棒運(yùn)行軌跡不經(jīng)過其他樣本的上空,這樣不會交叉污染。