低溫生物菌種的篩選分離

篩選

工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩，挑選具有某種能力的有用菌種。

分離

首先是從土壤或腐生植物中收集含菌樣品，用無菌水稀釋后，涂布于置有適宜細(xì)菌或霉菌生長的瓊脂培養(yǎng)基平皿上，并將其倒置于恒溫箱中，培養(yǎng)一定時(shí)間，平皿上長出的許多單個(gè)菌落（單一微生物的集落）經(jīng)分別分離后即為各種純種菌株，簡(jiǎn)稱純種，移種至試管斜面培養(yǎng)基上，置4℃冰箱備用。

生物有機(jī)肥產(chǎn)品生產(chǎn)安全性分析

雖然目前生物有機(jī)肥產(chǎn)品生產(chǎn)大多采用植物根際促生菌， 但近年來很多研究發(fā)現(xiàn)，芽孢菌屬和類芽孢菌個(gè)別菌株能產(chǎn)生菌素。 即便在安全分級(jí)目錄中列為一級(jí)免做理學(xué)試驗(yàn)的， 開展生物有機(jī)肥產(chǎn)品生產(chǎn)生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)， 從源頭上把好安全關(guān)是產(chǎn)品質(zhì)量安全的首要保障。通過調(diào)研發(fā)現(xiàn)， 用于生物有機(jī)肥產(chǎn)品的部分生產(chǎn)分類地位不明確， 甚至混亂， 難以從源頭上進(jìn)行安全風(fēng)險(xiǎn)的初步識(shí)別 。 以常見生產(chǎn)枯草芽孢菌為例， 實(shí)際上是一個(gè)表型相似的群體， 包括枯草芽孢菌、 地衣芽孢菌、 短小芽孢菌、解淀粉芽孢菌、 深褐 （萎縮） 芽孢菌、莫哈韋（莫杰夫） 芽孢菌、 死谷芽孢菌、 索諾拉沙漠芽孢菌、 特基拉芽孢菌、暹羅芽孢菌等 10個(gè)緣種。生產(chǎn)企業(yè)送檢的枯草芽孢菌生物有機(jī)肥產(chǎn)品， 經(jīng)鑒定發(fā)現(xiàn)很多產(chǎn)品實(shí)際為解淀粉芽孢菌， 且許多菌株具有很強(qiáng)的溶血作用。通過對(duì)生產(chǎn)企業(yè)調(diào)研發(fā)現(xiàn)， 部分生產(chǎn)企業(yè)選擇分離于動(dòng)物腸道的解淀粉芽孢菌作為產(chǎn)品生產(chǎn)用菌株， 該類生產(chǎn)發(fā)酵周期短、 活菌數(shù)量高、 生產(chǎn)成本低， 但產(chǎn)品的應(yīng)用功效不佳， 溶血風(fēng)險(xiǎn)大 ， 建議慎用。而植物來源的解淀粉芽孢菌溶血風(fēng)險(xiǎn)小， 產(chǎn)品應(yīng)用效果好， 推薦使用。

生物菌種發(fā)酵成有機(jī)肥如何操作的？

發(fā)酵肥料操作過程：

1、菌種一般用量為0.2%--0.5%。

2、原輔料及要求：主要物料：水果渣、干蔗渣、食用菌渣、酒糟、啤酒糟、糖渣、醋渣、淀粉渣、木薯渣、檸檬酸渣、醬油渣、味精渣、粉渣、豆腐渣、藥渣、油渣、油餅粕、糠麩、棉菜粕、霉變飼料、污泥、糖廠啤酒廠渣泥、屠宰下腳料、潲（泔）水、剩飯菜、人動(dòng)物糞便等大宗物料。

輔料：各種農(nóng)作物秸稈、樹葉雜草、瓜藤、稻草、松殼、花生殼、鋸木屑、谷殼粉、統(tǒng)糠等干燥、粉碎、高碳即可。

3、原輔料配比：主料∶輔料=5:1-3:1。

4、水分控制在60-65%，手抓物料成團(tuán)剛好出水。

5、按要求將菌種、主料和輔料全部混合均勻

6、環(huán)境溫度15℃以上，一次堆料不少于4方，堆成寬1.5～2米、高0.6米左右、長度不限的堆，并用棍在堆內(nèi)打通氣孔。

7、堆溫升至50℃時(shí)開始翻倒，每天一次，如堆溫超過65℃，再加次翻倒。溫度控制在70℃以下，溫度太高對(duì)養(yǎng)分有影響。

8、腐熟標(biāo)志：堆溫降低，物料疏松，無物料原臭味，稍有氨味，堆內(nèi)產(chǎn)生白色菌絲。

9、腐熟的原肥：直接使用，生產(chǎn)商品有機(jī)肥、生物有機(jī)肥、有機(jī)無機(jī)復(fù)混肥、生物有機(jī)無機(jī)復(fù)混肥等。

注意：

①視水分多少增減配比，發(fā)酵混合物的總水分應(yīng)控制在60～65%。過高過低均不利于發(fā)酵，水過少，發(fā)酵慢；水過多會(huì)導(dǎo)致通氣差、升溫慢并產(chǎn)生臭味。水分合適與否判斷辦法：手緊抓一把物料，指縫見水印但不滴水，落地即散。

②如果按每噸添加1公斤尿素或10公斤過磷酸鈣發(fā)酵效果。