低溫生物菌種——篩選模型

根據(jù)不同的篩選目的，采用不同的篩選模型。如常規(guī)篩選產(chǎn)生菌的方法是將土壤中分離所得的純種，在含有瓊脂培養(yǎng)基的平皿上培養(yǎng)后，用打孔器將菌塊移至含有試驗(yàn)菌的瓊脂培養(yǎng)基上，在適宜的溫度下培養(yǎng)一定時(shí)間后取出，如在菌塊的周圍有透明的抑菌圈，則表明此菌種具有產(chǎn)生抑制試驗(yàn)菌生長(zhǎng)的抑菌物質(zhì)的能力。所得菌種經(jīng)過搖瓶液體發(fā)酵，選出生產(chǎn)能力高的菌種。另一方面對(duì)所提取的進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析、藥理試驗(yàn)及臨床試驗(yàn)等，確為有效者，即可作為生產(chǎn)菌種。又如篩選脂肪酶生產(chǎn)菌種的方法是將分離所得的霉菌涂布于含有牛脂的瓊脂培養(yǎng)基上，恒溫培養(yǎng)一定時(shí)間，如菌落周圍出現(xiàn)透明圈的，則該菌具有分解脂肪的能力，進(jìn)一步作搖瓶發(fā)酵測(cè)定酶活力，挑選產(chǎn)量高者作生產(chǎn)菌種的出發(fā)菌株。

低溫生物知多少？

實(shí)驗(yàn)室的傳代保藏過程

1. 按說明書要求復(fù)溶菌粉，轉(zhuǎn)種于適當(dāng)?shù)脑鼍囵B(yǎng)基內(nèi)（G1），復(fù)壯后轉(zhuǎn)接至平板上，并于適當(dāng)溫度下培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間，分離出單個(gè)純種菌落，此為第2代（G2）。

2. 鑒定完成后，挑取純菌落制成濃菌懸液用于制備甘油冷凍管，同時(shí)挑取純菌落轉(zhuǎn)接斜面作為工作用。此時(shí)，保藏為第2代，但工作用則為第三代。

3. 將第2代管冷凍保存，將工作用于適當(dāng)溫度下培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間后可用于試驗(yàn)。

4. 取一支冷凍保存的G2代轉(zhuǎn)種于平板和斜面培養(yǎng)基上，平板上的制成冷凍保藏管第三代（G3），斜面培養(yǎng)基經(jīng)適當(dāng)溫度下培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間后用作工作用（W3）。

5. 將第三代（G3）冷凍或低溫保存，將生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)種后的G2經(jīng)滅菌處理后丟棄。

6. 當(dāng)工作用代數(shù)小于5時(shí)，可直接用上一代工作用轉(zhuǎn)接下一代工作用，如W3可直接轉(zhuǎn)接為W4。

7. 按上述程序操作，直至G4轉(zhuǎn)為W5為止，需重新開啟安瓿，再重復(fù)上述操作程序、保藏和使用。

以上方法中，被分為兩類。傳代用和工作用，傳代用用于甘油冷凍管法保藏，工作用用斜面低溫保藏法保藏。

實(shí)驗(yàn)證明，甘油冷凍管的有效期至少為2年，但其主要適用于細(xì)菌（需氧）、酵母菌的傳代、保藏、真菌和芽孢類細(xì)菌則需應(yīng)用其它方法。

低溫生物菌種的特點(diǎn)

種類明確，作用清楚

微生物肥料起作用的微生物必須經(jīng)過嚴(yán)格的鑒定，其分類地位明確，對(duì)人、畜、植物無害，也不會(huì)破壞土壤微生態(tài)環(huán)境。例如，某些假單胞菌在生長(zhǎng)和代謝過程中，可以產(chǎn)生促進(jìn)植物生長(zhǎng)的物質(zhì)，但也產(chǎn)生某些有害物質(zhì)，有的甚至是人、動(dòng)物或植物的病原菌，這類微生物就不能作為微生物肥料。事實(shí)上，曾有使用未經(jīng)嚴(yán)格鑒定的微生物而造成危害的教訓(xùn)?！坝行?、無害”是生產(chǎn)、施用微生物肥料的原則，許多國(guó)家對(duì)此有明確的立法。