ELISA試劑盒的發(fā)展前景

臨床測定技術(shù)的發(fā)展主要在于方法學(xué)的發(fā)展，而方法學(xué)的發(fā)展依托于試劑生產(chǎn)技術(shù)不斷進步更新和型標(biāo)記物的應(yīng)用。分子生物學(xué)正在并肯定會讓對整個生命科學(xué)有一個徹底的認識，其對測定技術(shù)發(fā)展的影響也是直接而又有效的，對以些難以檢測的生物活性物質(zhì)的測定，并且大大提高了檢測的靈敏度和特異性。

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ELISA試劑盒的應(yīng)用領(lǐng)域

ELISA法是診斷中的一項新技術(shù)，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的病種等方面的診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果，認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此，也適合于流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定，而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴大，可概括四個方面：

1、酶染色各種細胞內(nèi)成份的定位。

2、研究抗酶的合成。

3、顯現(xiàn)微量的沉淀反應(yīng)。

4、定量檢測體液中抗原或成份。

Elisa試劑盒的注意事項

Elisa試劑盒是否滅活：加熱可滅清中補體系統(tǒng)，在較少數(shù)情況下（培養(yǎng)ES細胞，平滑肌細胞時）建議滅活，在培養(yǎng)其余細胞時不建議滅清。滅活非常容易產(chǎn)生沉淀，如必須滅活請按56℃，30 min，輕微搖晃原則操作，滅活溫度高、時間長、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。

Elisa試劑盒培養(yǎng)基：無培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性、細胞體外分化方面有優(yōu)勢，但是，仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物，尤其是在原代培養(yǎng)或細胞生長狀態(tài)不良時，常常會先使用有的培養(yǎng)液進行培養(yǎng)，待細胞生長旺盛后再換成培養(yǎng)液。

Elisa試劑盒——Elisa實驗常見問題及解決方案

不正常的標(biāo)準曲線

1  錯誤的方法重懸標(biāo)準品  加入正確量的溶液重懸標(biāo)準品，重懸充分

2  標(biāo)準品稀釋錯誤  按照說明書要求稀釋標(biāo)準品

3  標(biāo)準品污染  使用一次性的滅菌吸頭， 標(biāo)準品貯存于2-8 ℃

4  錯誤的倍比稀釋步驟  按照說明書倍比稀釋標(biāo)準品

5  波長選擇錯誤 TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用，而 前者比色波長為450nm，后者為492nm。雙波長比色分析優(yōu)于單波長。

6  標(biāo)準品混用  不同批號試劑勿混用

7  試劑盒在運輸途中時間太長，溫度太高，標(biāo)準品失活  盡量縮短運輸時間，夏季應(yīng)放冰塊降溫

8  ELISA未終止而直接檢測450nm和620nm TMB顯色需終止后檢測，否則會出現(xiàn)620nm比450nm讀數(shù)高的現(xiàn)象。（數(shù)值仍有梯度規(guī)律）