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色譜柱一般用硅膠作基質(zhì)，只能在pH2-9的范圍使用。柱使用一段時(shí)間后，可能會(huì)有一些吸附作用強(qiáng)的物質(zhì)留在柱頂，尤其是一些有色物質(zhì)更容易在柱頂?shù)奶盍仙峡吹?。在使用一段時(shí)間后，新的柱頂填料會(huì)塌陷，使柱效降低，此時(shí)還可補(bǔ)加填料，使柱效恢復(fù)。如 ODS柱，在每次工作結(jié)束后用強(qiáng)力洗脫劑，如 ODS柱，以沖洗到基線平衡。用鹽緩沖液作流動(dòng)相時(shí)，用完后用無(wú)鹽流動(dòng)相沖洗。含有鹵族元素的化合物(氟、氯、)可能對(duì)不銹鋼管道造成腐蝕，不適合長(zhǎng)時(shí)間接觸。HPLC儀柱式安裝如果不經(jīng)常使用，應(yīng)每4-5天開(kāi)一次電源，沖洗15分鐘。

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探測(cè)器的維護(hù)1.光源部分探測(cè)器的重要組成部分是光源，光源對(duì)發(fā)射能量有要求，一旦能量衰減到一定程度，就會(huì)出現(xiàn)一系列影響光源使用的問(wèn)題，如基線噪聲變大、靈敏度下降等。一般 UV燈的使用壽命為2000 h，當(dāng)達(dá)到這一時(shí)，我們就特別注意燈的能量狀況，可通過(guò)儀器維護(hù)軟件中自帶的“燈能測(cè)試”功能判斷，測(cè)試結(jié)果將分別評(píng)估低、中、高三個(gè)波長(zhǎng)段的能量，一旦某一波長(zhǎng)段測(cè)試結(jié)果顯示失敗，就表示需要更換燈。2.檢測(cè)池探測(cè)器的另一個(gè)重要組成部分就是檢測(cè)池，也稱為循環(huán)池。一般來(lái)說(shuō)，檢測(cè)池是大家比較關(guān)心的問(wèn)題之一，因?yàn)闄z測(cè)池的耐壓能力一般都不高，所以一旦被堵住，很容易造成損壞。實(shí)際上，檢測(cè)池一般不太容易堵塞，因?yàn)閹缀跛械念w粒雜質(zhì)都會(huì)被色譜柱截獲，因此堵塞檢測(cè)器的東西基本不是來(lái)自樣品，很可能是后來(lái)“產(chǎn)生”，例如，含鹽流動(dòng)相殘留在檢測(cè)池中導(dǎo)致鹽析出。六、廢液處理LC廢液中大部分含有，對(duì)人體有一定的危害，對(duì)環(huán)境也會(huì)造成污染，嚴(yán)禁隨意傾倒，應(yīng)及時(shí)處理。當(dāng)前，國(guó)內(nèi)大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都是把廢液運(yùn)往廢液處理站進(jìn)行無(wú)害化處理。

如果換下來(lái)的是灰黑色的，這是常見(jiàn)的情況，這是由于泵頭密封墊磨損造成的，如果出現(xiàn)頻繁更換白頭切替換下來(lái)的都是灰黑色的，這是常見(jiàn)的情況，這是因?yàn)楸妙^密封墊的磨損所致，如果出現(xiàn)頻繁更換白頭切替換下來(lái)的情況，就該講衛(wèi)生了。3.3流動(dòng)相替代有時(shí)會(huì)在泵的使用中出現(xiàn)，這種替代是指將流動(dòng)相從反相溶劑替換為正相溶劑，或反過(guò)來(lái)替換為溶劑，這個(gè)過(guò)程的是與流動(dòng)相的兼容性，常用的正反相色譜溶劑是不互溶的，因此在更換中間，必須用異沖洗系統(tǒng)，保證管路中所有的原有溶劑都不能完全溶解。

繼續(xù)往前走，到進(jìn)樣器，進(jìn)樣器分為手動(dòng)和自動(dòng)兩大類，雖然它們的工作方式不同，但要點(diǎn)基本相同：4.1自動(dòng)進(jìn)樣器常見(jiàn)的問(wèn)題是臟，用術(shù)語(yǔ)稱其為交叉污染，交叉污染產(chǎn)生的原因非常直接，樣品在進(jìn)樣針/外表面殘存，并且在下一個(gè)進(jìn)樣進(jìn)入色譜系統(tǒng)時(shí)，要解決交叉污染，也很簡(jiǎn)單，就是洗，自動(dòng)進(jìn)樣器都會(huì)有洗針的功能，如果樣品濃度較高，就會(huì)有洗針的功能。如忘了開(kāi)啟洗針功能，可能會(huì)殘留在針座或流通閥上，此時(shí)要將這兩個(gè)部件清洗，需要按照說(shuō)明書(shū)上的維修步驟將這兩個(gè)部件拆開(kāi)超聲清洗。4.2在自動(dòng)進(jìn)樣器中還出現(xiàn)了峰面積重新生成的問(wèn)題。一般這是因?yàn)樽詣?dòng)進(jìn)樣器在吸樣品時(shí)有問(wèn)題，首先要觀察樣品的液面是否夠高，以保證進(jìn)樣器能被吸進(jìn)；如果排除了這個(gè)問(wèn)題，要看一下自動(dòng)進(jìn)樣器的設(shè)置，對(duì)于一些粘度大的樣品，要降低自動(dòng)進(jìn)樣器的吸收速度，這個(gè)時(shí)候要看一下樣品瓶的吸入量；當(dāng)然，還有一些比較少見(jiàn)的問(wèn)題：樣品被吸附在樣品瓶上，此時(shí)要考慮更換樣品瓶；還有一種情況，是因?yàn)闃悠菲康钠可w擰緊太緊，所以這個(gè)時(shí)候要考慮把瓶蓋擰松。

有些孩子做的比較好，為了防止其，禁止灰塵進(jìn)入小房間，創(chuàng)造了種種發(fā)明，他們?cè)谖蓓斏香@了幾個(gè)小孔，進(jìn)氣孔用濾頭堵住，既能進(jìn)氣又能防塵，效果很棒。有些使用了安全帽，其效果是一樣的。流化床本身的要求也很?chē)?yán)格，超聲波除氣當(dāng)然是必選，微膜過(guò)濾也要經(jīng)過(guò)這一關(guān)，除去有害氣體，濾掉有害顆粒，還要經(jīng)過(guò)濾頭的檢驗(yàn)——濾頭孔徑是0.45 um，材料分為玻璃燒英和不銹鋼的，如果這個(gè)東西臟了的話，就會(huì)造成吸液不暢，不過(guò)可以進(jìn)行清洗，玻璃材質(zhì)的一般是用稀浸過(guò)夜的。

除氣裝置流動(dòng)相經(jīng)過(guò)過(guò)濾頭檢測(cè)的流動(dòng)相自然要經(jīng)過(guò)預(yù)脫氣，這樣可以大大降低脫氣機(jī)的工作負(fù)荷，因?yàn)槊摎鈾C(jī)的脫氣效率是一定的，如果溶解的氣體超過(guò)了脫氣機(jī)能處理的大值(特別是在高流速的情況下)，氣體就會(huì)去除不干凈，這時(shí)就有可能在混合時(shí)，形成氣泡影響儀器壓力波動(dòng)和噪音。流動(dòng)性耐動(dòng)，如果長(zhǎng)時(shí)間待在脫氣機(jī)中，由于微生物的存在，細(xì)菌藻類很可能繼續(xù)繁殖，脫氣管道中布滿了藻類而堵塞，亦或也會(huì)聚合，因此，長(zhǎng)時(shí)間不用的脫氣機(jī)一定將水替換成，防止長(zhǎng)藻和聚合。堵漏是一對(duì)歡喜冤家，液相色譜上可以堵住的地方，也都有可能漏出，脫氣機(jī)也不例外，通常漏液有兩種可能，一種是接頭松動(dòng)，再擰緊，再擰緊，就比較倒霉了。

HPLC的 HPLC經(jīng)驗(yàn)：【1】泵壓跳動(dòng)，跳動(dòng)范圍約10 bar。對(duì)策：原來(lái)的小白頭有點(diǎn)臟，換了之后還沒(méi)有解決；2、將主動(dòng)閥上的閥芯取出后，發(fā)現(xiàn)類似氣泡存在，在超聲5分鐘內(nèi)浸入-水溶液中試著除去氣泡，重新安裝后觀察，仍未解決；更換新閥芯，安裝完畢后，再也沒(méi)有跳動(dòng)，觀察一段時(shí)間后比較平穩(wěn)，順利解決?！?】失敗原因：①plug homing over pressure②注漿和設(shè)流速時(shí)，無(wú)壓力，無(wú)液體流出③檢光閘不能復(fù)位④進(jìn)完大濃度樣品后，進(jìn)空白相應(yīng)位置也出峰。

起因：①在線過(guò)濾堵塞②泵頭下訂單向閥堵?、蹤z測(cè)池很臟，也有可能是光路有些堵，再不行可能是燈壽命到了④抹布臟了，需要更換。對(duì)策：①在線濾網(wǎng)卸下，置燒杯，加純化水煮沸5-10分鐘后，超一下一般就可以了，如果還堵的話就拿稀泡，還不行，就換新的，這是個(gè)消耗品②將泵頭下端向閥卸下，兩個(gè)都可能堵死，剛卸下來(lái)時(shí)豎在耳邊搖晃就聽(tīng)不到聲音了。只要簡(jiǎn)單地拿起洗耳球?qū)蜗蜷y吹一次(注意方向)，吹了沒(méi)反應(yīng)可以拿溶劑超聲檢查，但不可用水煮，一般超至在耳邊搖能聽(tīng)到聲音就不會(huì)影響到。③先用溶劑將檢測(cè)池沖洗一下，具體的試樣用什么試樣；若不沖洗，將檢測(cè)池卸下，看燈能量，若能量還可以(有個(gè)幾千)，可能得清洗光路。首先還是請(qǐng)工程師來(lái)清潔，因?yàn)橐謇淼牧慵谔綔y(cè)器下面有一個(gè)黑色的碎片，中間有一條縫，而且那一塊的螺絲都是八角的，卸起來(lái)很麻煩。④拿出5個(gè)樣品盤(pán)，可以看到里面有一個(gè)黑色凸起(看不清是用電筒)，平時(shí)進(jìn)樣針就是從那個(gè)地方吸的。伸手就能卸下來(lái)，里面有一個(gè)小白圈(用多了自然就黑了)，換一個(gè)新的就好了，一般只有10個(gè)才能買(mǎi)儀器。