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發(fā)布時(shí)間:2021-10-13 11:12  






武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。苜蓿不僅營養(yǎng)豐富,其次生代謝產(chǎn)物苜蓿皂甙(alfalfasaponins)近年來被認(rèn)為是苜蓿的藥用功能的主要來源:具有良好的降膽固醇、效果,還有、、、殺蟲等藥用及生物活性。





GFP,實(shí)際是給你要研究的物質(zhì)加上標(biāo)記,在此相當(dāng)于報(bào)告蛋白的作用。)是世界上糧菜兼用型作物,在人們的日常生活和國民經(jīng)濟(jì)中起著舉足輕重的作用。使用GFP必須構(gòu)建融合蛋白載體,并在轉(zhuǎn)染之后有效表達(dá)。這樣,若在熒光顯微鏡下看到細(xì)胞內(nèi)某一部位存在GFP信號,說明和GFP融合的蛋白也存在于該部位,這樣就達(dá)到了確定某物質(zhì)亞細(xì)胞定位的目的。




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由稻瘟菌(Magnaporthe grisea)引起的稻瘟病是重要的水稻病害之一。以研究稻瘟菌致病基因?yàn)橹行?探討致病相關(guān)基因的種類及其功能,生理小種和致病基因的關(guān)系,致病基因的遺傳分離和在群體中的轉(zhuǎn)移規(guī)律等等,能夠?yàn)樗究刮列匝芯亢偷疚敛』瘜W(xué)防治、生物防治提供理論基礎(chǔ)。Bra1編碼蛋白的氨基酸序列中包含有BAHD酰基轉(zhuǎn)移酶家族特有的HXXXD功能區(qū)以及DFGWG保守結(jié)構(gòu)域,說明Bra1基因是BAHD?;D(zhuǎn)移酶基因家族的一個(gè)成員。 本研究利用在實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)建成的根癌農(nóng)介導(dǎo)的稻瘟菌T-DNA插入突變體庫,挑選了7個(gè)致病力缺陷的突變體,提取基因組DNA,PCR檢測確認(rèn)T-DNA的插入。利用DW-ACP-PCR(DNA Walking-Annealing Control Primer-PCR)技術(shù)對T-DNA右邊界側(cè)翼序列進(jìn)行擴(kuò)增,7個(gè)突變體都獲得了特異條帶。對這些特異條帶進(jìn)行并測序,其中5個(gè)測序成功,另外2個(gè)測序失敗。將成功的序列與稻瘟菌基因組和NCBI數(shù)據(jù)庫比對,發(fā)現(xiàn)1個(gè)為載體pCAMBIA1300序列,4個(gè)與稻瘟菌的基因組相似性達(dá)93%~99%,認(rèn)為是T-DNA插入位點(diǎn)的側(cè)翼序列。


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谷氨酰胺合成酶(GS; EC 6.3.1.2)是植物N素同化途徑中較為關(guān)鍵的催化酶之一,被稱為是植物中無機(jī)態(tài)N轉(zhuǎn)化為有機(jī)態(tài)N的“門戶”,對植物N素吸收、同化和利用效率(Nitrogen use efficiency)有著極為重要的影響。高等植物中的GS同工酶主要分為兩類:胞質(zhì)型GS1主要同化從土壤吸收的初級氨及再同化從植物體內(nèi)各個(gè)N循環(huán)途徑所釋放的氨;質(zhì)體型GS2同化由NO3--N還原而來及光呼吸過程所釋放的氨。近年來,基因工程技術(shù)被廣泛應(yīng)用于提高植物的耐鹽性,將抗逆基因?qū)雰?yōu)良大豆品種,培育抗逆高產(chǎn)新品系,為解決這一問題提供了新途徑。N素供應(yīng)對甜瓜的生長發(fā)育、果實(shí)的產(chǎn)量和品質(zhì)形成有非常重要的影響,目前甜瓜N素代謝研究還停留在N營養(yǎng)生理與果實(shí)品質(zhì)及產(chǎn)量層面,在分子機(jī)理水平的研究報(bào)道很少,尤其是對與N素同化和利用效率緊密相關(guān)的GS酶基因的研究還是空白。因此,本文以甜瓜作為對象,在從甜瓜中出胞質(zhì)型GS基因M-GS1的基礎(chǔ)上,對M-GS1及課題組到的甜瓜質(zhì)體型GS基因M-GS2的基因組拷貝數(shù)、表達(dá)產(chǎn)物的亞細(xì)胞定位及生化特性、在甜瓜中的表達(dá)調(diào)控特征等進(jìn)行了研究和對比分析,從基因、蛋白質(zhì)和細(xì)胞水平對甜瓜GS基因進(jìn)行了系統(tǒng)的功能驗(yàn)證和鑒定,開展了甜瓜N營養(yǎng)代謝的分子生理研究;進(jìn)而在植株水平研究M-GS1在轉(zhuǎn)基因超量表達(dá)后提高植株N素同化效率的潛能,為甜瓜GS基因的應(yīng)用、利用GS基因改良植物N素利用效率的研究提供新的材料和依據(jù)。


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是常見的、對人類健康危害比較嚴(yán)重的環(huán)境污染物之一,可通過皮膚、呼吸道和消化道等途徑進(jìn)入人體,導(dǎo)致身體組織發(fā)生病變,從而引起多種疾病和的發(fā)生。因此,毒性研究已經(jīng)成為大家關(guān)注的焦點(diǎn)之一。構(gòu)建PnCHI1的原核表達(dá)載體,誘導(dǎo)并純化獲得重組蛋白,體外平板抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示PnCHI1原核重組蛋白對尖孢鐮刀菌、茄腐鐮刀菌、輪枝鐮刀菌3種三七根腐病菌的菌絲生長具有很強(qiáng)的抑制活性。能抑制細(xì)胞分裂,誘導(dǎo)微核形成,導(dǎo)致部分細(xì)胞,但的毒性作用機(jī)制不是很清楚。酵母具有遺傳背景簡單,生長周期短等優(yōu)點(diǎn),是研究真核生物細(xì)胞學(xué)機(jī)制的模式生物。已有研究證明,可以誘導(dǎo)酵母細(xì)胞凋亡,并且伴隨著胞內(nèi)活性氧(ROS)水平的升高,但是關(guān)于誘導(dǎo)酵母細(xì)胞凋亡的調(diào)控機(jī)制研究尚處在起步階段,尤其是動(dòng)物體內(nèi)相對保守的凋亡抑制基因BCL-2和CED-9在此過程中的作用尚未見報(bào)道。本文以酵母細(xì)胞為主要材料,研究了亞誘導(dǎo)細(xì)胞的作用機(jī)制。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下: 濃度為1-7 mmol/L的亞可抑制酵母細(xì)胞生長,并具有劑量依賴性,其中7 mmol/L亞幾乎完全抑制了細(xì)胞的生長和分裂。亞可誘導(dǎo)酵母細(xì)胞,細(xì)胞率隨處理濃度的升高和作用時(shí)間的延長逐漸升高。利用ROS熒光指示劑DCFH-DA, Ca2 熒光指示劑Fluo-3AM和NO熒光指示劑DAF-FM DA檢測胞內(nèi)ROS、Ca2 和NO水平,發(fā)現(xiàn)亞可誘導(dǎo)酵母胞內(nèi)ROS, Ca2 和NO水平顯著升高。


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