低溫生物的影響因素有哪些

菌的質(zhì)量：保藏的應培養(yǎng)在營養(yǎng)豐富的條件下，使之進入穩(wěn)定期，稍老一些的菌體對環(huán)境抵抗力強。另處，作為冷凍干燥的菌懸液細胞濃度要高不同的菌對冷凍干燥的耐受程度不同，如果保存的菌液細胞濃度不高，就會使以后傳種造成困難，保存期也會受到影響。

保護劑：不同種類的保護劑對不同微生物的作用是不同的，如個別在脫脂乳作保護劑的情況下失敗率高達99.99%，而采用葡聚糖等混和保護劑時失敗率大大減少。一般情況下，那些容易保存的對保護劑的要求不很嚴格，而不易保存的對保護劑的要求卻很苛刻。因此，選擇好的保護劑是冷凍干燥保存的關(guān)鍵因素。

干燥速度：實驗表明，慢速干燥比快速干燥存活率高，如青霉菌6h干燥存活率為67.3%，而3h為59%。

空氣的影響：冷凍干燥后空氣對細菌細胞影響較大，可導致細胞損傷進而失敗，故在凍干后應立即在真空下融封，才有利于長期保存。

溫度的影響：在干燥和真空狀況下溫度的影響遠沒有上述幾項因素重要，因此可以在室溫下保存，但許多微生物在4℃保存的存活率要比在室溫下高1倍。

含水量的影響：水分含量過高對菌存活不利，完全脫水也不利于保存，一般把干燥后的細胞含水量控制在3%以下(1%-3%)

低溫生物的冷凍干燥保藏法

(1)準備安瓿管用于冷凍干燥保藏的安瓿管宜采用中性玻璃制造，形狀可用長頸球形底的，亦稱淚滴型安瓿管(圖Ⅶ-15)，大小要求外徑6-7.5mm，長105mm，球部直徑9-11mm，壁厚0.6-1.2mm。也可用沒有球部的管狀安瓿管。塞好棉塞，1.05kg/cm2>，121.3℃滅菌30分鐘，備用。

(2)準備，用冷凍干燥法保藏的，其保藏期可達數(shù)年至十數(shù)年，為了在許多年后不出差錯，故所用要特別注意其純度，即不能有雜菌污染，然后在適培養(yǎng)基中用適溫度培養(yǎng)，使培養(yǎng)出良好的培養(yǎng)物。細菌和酵母的菌齡要求超過對數(shù)生長期，若用對數(shù)生長期的進行保藏，其存活率反而降低。一般，細菌要求24-48小時的培養(yǎng)物;酵母需培養(yǎng)3天;形成孢子的微生物則宜保存孢子;線菌與絲狀真菌則培養(yǎng)7-10天。

(3)制備菌懸液與分裝以細菌斜面為例，用脫脂牛乳2ml左右加入斜面試管中，制成濃菌液，每支安瓿管分裝0.2ml。

(4)冷凍冷凍干燥器有成套的裝置出售，價值昂貴，此處介紹的是簡易方法與裝置，可達到同樣的目的。

將分裝好的安瓿管放低溫冰箱中冷凍，無低溫冰箱可用冷凍劑如干冰(固體CO2>)酒精的液或干冰酮液，溫度可達-70℃。將安瓿管插入冷凍劑，只需冷凍4-5分鐘，即可使懸液結(jié)冰。

申請時，有新的低溫生物的必須要辦理保藏嗎？

如果得到了審批權(quán)人卻沒有構(gòu)成的新要件，顯而易見是需要保藏的。發(fā)酵飼料原料與配方:配制好的發(fā)酵飼料1000公斤，水350-400公斤(夏天350，冬天400)，飼料發(fā)酵劑5公斤,100-200克納豆菌。 制作稀釋活化發(fā)酵液:將5公斤飼料發(fā)酵劑和100-200克納豆菌倒入350-400公斤水中攪拌均勻制成活化發(fā)酵液。 將制成的活化發(fā)酵液與1000公斤發(fā)酵飼料混合均勻，濕度以手捏成團不滴水，一觸即散為宜。有攪拌機的大型養(yǎng)殖場將活化發(fā)酵液慢慢加入飼料中攪拌均勻即可;沒有攪拌機的養(yǎng)殖戶將活化發(fā)酵液慢慢少量噴到飼料上，用鐵鍬攪拌均勻，注意:不能有團塊、水結(jié)塊，用手將團塊、水結(jié)塊搓散攪拌均勻。 大型養(yǎng)殖場可以將配置好的飼料在地面壓實堆成垛或者裝入水泥池壓實，用塑料薄膜密封或者使用厚實的不透氣的塑料碎團塊、水結(jié)塊。