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制備型液相色譜儀
制備型液相色譜儀通常都被認為和大容量色譜柱和高流速有關(guān)聯(lián)的。然而并不是以設(shè)備的大小和系統(tǒng)消耗的流動相的多少來決定制備液相色譜,而是依據(jù)分離目的來決定。分析液相的目的是給一種組份進行定量和定性。與傳統(tǒng)的純化方法比較,制備液相是一種更有效的分離方法,因此被廣泛應(yīng)用在樣品和產(chǎn)品的提取和純化上。
液相色譜是近30年發(fā)展起來的一種具有高靈敏度、高選擇性的快速分離分析技術(shù)。它既能用于微量組分的分析測定,又能用于大量的制備分離,靈活多樣,其應(yīng)用范圍已超過其他各種分離方法,尤其在中藥樣品的分析分離方面更充分發(fā)揮它的特長,為推動該領(lǐng)域的進步和發(fā)展作出了巨大貢獻。
半制備液相色譜層析系統(tǒng)開機
1、接通電腦和儀器電源(接通電源之前可先把吸頭拿到要使用的流動相瓶中);
2、開儀器電源開關(guān),一般先上后下,下為檢測器開關(guān);
3、檢查流動相是否夠,儀器上記錄的溶劑量時候正確;
4、開電腦;
5、打開儀器聯(lián)機軟件進入界面,點擊啟動設(shè)置泵流速為10,此時儀器中應(yīng)該有液體流出;
6、點擊平衡然后點擊每個波長和調(diào)整沖一段時間,待壓力穩(wěn)定后可以進樣。
液相色譜的操作步驟
1).首先對流動相進行過濾,根據(jù)需要選擇不同的濾膜,一般為有機系和水系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。
2).對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。
3).正常情況下,儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘,然后再進入測試用流動相(如流動相為緩沖試劑,則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘,直至色譜柱中有機相沖凈為止)。
4).一般情況下,流動相沖洗20-30分鐘后,儀器方可穩(wěn)定,重要的是儀器基線走后,方可進樣測試。
5).同時進兩針標樣,將其結(jié)果相比較,其結(jié)果的比值在0.98-1.02之間后,就可以正式進行樣品的測試了。
6).樣品測試結(jié)束后,就要進行色譜儀及色譜柱的清洗和維護。如流動相為緩沖試劑,同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘,方可用有機相進行保護,否則,有損色譜柱。
7).關(guān)機時,先關(guān)計算機,再關(guān)液相色譜。
8).填寫登記本,由負責(zé)人簽字。