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凋亡、及ai變以及通路表達(dá),細(xì)胞信號傳導(dǎo)及基因表達(dá)的調(diào)控,細(xì)胞的分化及其調(diào)控機(jī)理,
都與細(xì)胞的力學(xué)特性有關(guān),細(xì)胞組織力學(xué)不僅揭示正常生命機(jī)體生長、發(fā)育和衰老的機(jī)理和自然規(guī)律,
而且對于闡明機(jī)體疾病的發(fā)病機(jī)理及提供診斷和治1療的基本原理,包括新型和新技術(shù)的研發(fā),
都是具有極其重要的理論和現(xiàn)實意義.
RCCS生物反應(yīng)器有什么不同的應(yīng)用?
RCCS生物反應(yīng)器的初目的是模仿微重力。在使用這臺反應(yīng)器用于地面實驗期間,我們發(fā)現(xiàn)這些反應(yīng)器中的細(xì)胞形成3D聚合體。從那以后,這些RCCS生物反應(yīng)器被用于細(xì)胞和組織培養(yǎng)的幾個領(lǐng)域。 RCCS生物反應(yīng)器的應(yīng)用范圍從基礎(chǔ)細(xì)胞生物學(xué)到航天生物學(xué),培養(yǎng)以及再生醫(yī)學(xué)和開發(fā),在將來,也許應(yīng)用于疾病的和損傷治1療。對于RCCS生物反應(yīng)器的各種各樣應(yīng)用的詳細(xì)說明。
美國Synthecon賽斯康RCCS-1H單轉(zhuǎn)頭微重力三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)
細(xì)胞傳代的一般方法?
開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH 培養(yǎng)液或MEM 培養(yǎng)液或199 等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血X清、慶大溶液(1 萬單位)、7.5%NaHC03 溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS 洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20 ml)(以上用具需經(jīng)121℃至
少15 分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可X疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH 培養(yǎng)液100ml 內(nèi),加入滅活小牛血X清10m1,慶大溶液0.3m1,7.5%碳酸氫鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS 洗液沖洗細(xì)胞表面1-2 次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1 細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1 細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4 天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
RCCS-3D系統(tǒng)中細(xì)胞的生長
在微重力狀態(tài)下細(xì)胞易于聚集,比在標(biāo)準(zhǔn)重力環(huán)境中產(chǎn)生更高的細(xì)胞密度B&C。促進(jìn)細(xì)胞間相互作用的原因是微重力使細(xì)胞粘附分子、細(xì)胞外基質(zhì)蛋白和其各自的受體發(fā)生組織特異性上調(diào)。微重力可能影響細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)(微絲)和與蛋白質(zhì)磷酸化作用有關(guān)的細(xì)胞內(nèi)信號機(jī)制B@!C。細(xì)胞骨架有可能是感知微重力的主要位點之一,在單細(xì)胞水平,細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的改變可用來解釋細(xì)胞內(nèi)磷酸化作用級聯(lián)反應(yīng)途徑的改變。