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微透析系統(tǒng)
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微透析探針是微透析實(shí)驗(yàn)中重要的組成部分。所有CMA的探針除了線性探針之外,都是采用同心圓的結(jié)構(gòu)來(lái)制作的。探針兩個(gè)端口,入口端和出口端。由于具有連續(xù)取樣、動(dòng)態(tài)觀察、定量分析、采樣量小等特點(diǎn),在神經(jīng)科學(xué)的領(lǐng)域中已獲得越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。一個(gè)內(nèi)部的導(dǎo)管能使灌流液從探針的入口端直接流到探針的頂端,隨之灌流液則會(huì)充滿半透膜和導(dǎo)管之間的區(qū)域,之后灌流液繼續(xù)沿著外管從出口流出。探針的所有金屬部分都經(jīng)過(guò)預(yù)處理以防止灌流液中的易變成分發(fā)生氧化。
清醒的動(dòng)物在做CNS的微透析實(shí)驗(yàn)時(shí),在植入探針之前需要在動(dòng)物醉狀態(tài)下先植入-個(gè)套管,等大鼠清醒要插入探針時(shí),可以把套管中的假探針拔出,再插入真正的探針開(kāi)始實(shí)驗(yàn),這樣就不用在動(dòng)物手術(shù)時(shí)就植入探針,保證探針的使用效率。
CMA (全名CMA/MICRODIALYSIS AB)成立于1984年, 是一家以研究為導(dǎo)向的高科技公司。 總部設(shè)于瑞典斯德哥爾摩, 其創(chuàng)辦人為瑞典的KAROLINSKA學(xué)院藥理大師URBAN UNGERSTEDT,任諾貝爾獎(jiǎng)病理學(xué)醫(yī)學(xué)評(píng)委。由其公司的名字,可以了解到CMA公司之主要產(chǎn)品為微透析設(shè)備:一種zui新的生物采樣技術(shù),可用于或清醒的生物上,對(duì)醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、生命科學(xué)等領(lǐng)域,提供嶄新技術(shù)的發(fā)展空間,目前以此技術(shù)發(fā)展的已有千篇以上。 上世紀(jì)70年代初,西班牙Delgado及瑞典URBAN UNGERSTEDT等人首先提出了“微透析”的概念。微透析(Microdialysis)是一種從生物體內(nèi)進(jìn)行動(dòng)態(tài)微量生化取樣的新技術(shù), 可用于麻或清醒的生物上, 具有體連續(xù)取樣、動(dòng)態(tài)觀察、定量分析、采樣量小、組織損傷輕等特點(diǎn)。
微透析在腦科學(xué)中的應(yīng)用
腦部微透析是利用微透析技術(shù)對(duì)特定腦部區(qū)域進(jìn)行連續(xù)灌注采樣,用于動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)動(dòng)物大腦內(nèi)源性和外源性物質(zhì)細(xì)胞外含量的變化的新技術(shù)。該技術(shù)常與電化學(xué)檢測(cè)、熒光、測(cè)定等系統(tǒng)聯(lián)合,對(duì)離子、單胺類、氨基酸神經(jīng)遞質(zhì)、能量物質(zhì)等物質(zhì)進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)的濃度變化監(jiān)測(cè)。離線研究指透析樣品放置一段時(shí)間后,采用液相-電化學(xué)/熒光等檢測(cè)腦化學(xué)物質(zhì)。由于具有連續(xù)取樣、動(dòng)態(tài)觀察、定量分析、采樣量小等特點(diǎn),在神經(jīng)科學(xué)的領(lǐng)域中已獲得越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。微透析系統(tǒng)結(jié)合電生理、光遺傳、行為學(xué)等研究手段同時(shí)檢測(cè),同步地不同數(shù)據(jù)進(jìn)行記錄分析。
微透析相對(duì)血液取樣的區(qū)別
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微透析相對(duì)血液取樣:(1)不需要樣品前處理
(2)樣品中沒(méi)有蛋白質(zhì)
(3)不需要取血
(4)取樣位置傷害
(5)能定時(shí)取樣
(6)直接投藥并且能持續(xù)給藥
(7)可以測(cè)定細(xì)胞外液中的神經(jīng)遞質(zhì)、未與血漿蛋白結(jié)合的游離小分子物質(zhì)濃度等。
腦微透析測(cè)定方法研究
腦微透析方法研究主要分為三種,分別為離線檢測(cè)、在體檢測(cè)和電化學(xué)檢測(cè)研究。離線研究指透析樣品放置一段時(shí)間后,采用液相-電化學(xué)/熒光等檢測(cè)腦化學(xué)物質(zhì);在線研究是微透析系統(tǒng)連接液相電化學(xué)、熒光系統(tǒng)或液質(zhì)直接進(jìn)樣分析,提高時(shí)間分辨率。微透析系統(tǒng)結(jié)合電生理、光遺傳、行為學(xué)等研究手段同時(shí)檢測(cè),同步地不同數(shù)據(jù)進(jìn)行記錄分析。第三種是微透析系統(tǒng)連接腦化學(xué)物質(zhì)實(shí)時(shí)分析系統(tǒng),直接進(jìn)樣分析,實(shí)現(xiàn)分鐘級(jí)檢測(cè)。