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三維細胞培養(yǎng)支架技術
一體化3D干l細胞擴增系統(tǒng)中的較大特點是培養(yǎng)室內(nèi)采用了三維細胞培養(yǎng)支架,此支架是運用其專有的3D精密微制造工藝特別設計制造的。2)纖維直徑是300μm,孔徑是400μm3DInsert-PCL支架有兩種:1)纖維直徑是300μm,孔徑是300μm。與一般海綿狀多孔支架材料不同,該支架具有100%的開放且相互連通的小孔,因此,細胞培養(yǎng)液可以容易地流通過支架空隙,從而消除了其他多孔支架經(jīng)常遇到的營養(yǎng)/廢物交換不暢的問題。該支架的制造材料有可生物降解和非生物降解兩種可供選擇。整個支架是由尺寸均勻的聚合物纖維構成,相鄰層面的纖維90o垂直排列,形成了三維的100%互連的多孔結構.
D 細胞培養(yǎng)-支架三維培養(yǎng)
當前市場上有多種類型的 3D 培養(yǎng)系統(tǒng),根據(jù)產(chǎn)品是否為細胞提供支撐(支架)材料(scaffold)大體可分為兩種類型:基于支架(scaffold)的培養(yǎng)體系和無 scaffold 的培養(yǎng)體系。干l細胞擴增與分化先進設備3D灌流式生物反應器系統(tǒng)此系統(tǒng)由DycubatorTM組織工程培養(yǎng)箱和3D生物反應器兩部分構成。今天來介紹一下有支架的三維培養(yǎng)體系。 注:無支架三維(3D)細胞產(chǎn)品綜合
一、根據(jù)支持物的性質(zhì)分類,基于 scaffold 的培養(yǎng)體系可分為天然細胞外基質(zhì)(Extracellular matrix,ECM)作為支持材料的 3D 培養(yǎng)和人造基質(zhì)作為支持材料的 3D 培養(yǎng)。
life 水凝膠中細胞的固定與標記
使用小分子物質(zhì),例如熒光標記 phalloidin,核酸染料,活性和毒性檢測試劑,增值檢測試劑等小分子物質(zhì)進行細胞標記方法,除了在孵育時間上適度延長以便能在水凝膠中充分擴散外,與傳統(tǒng)的 2D 細胞培養(yǎng)方式相同。而3DInsert-PCL支架是有彈性的,可以切割,可做切片。所培養(yǎng)的細胞如果經(jīng)基因修飾還有熒光蛋白,則可直接用于觀測,因凝膠完全透明不影響觀測結果。如果使用抗l體等大分子對細胞進行標記則不能直接在水凝膠中開展,因水凝膠的孔徑原因,不適合直接抗l體標記,需要使用 dextranase 將細胞從水凝膠中釋放出來,如果擔心細胞在操作過程中細胞生理活動波動,則可經(jīng)在凝膠中將細胞固定后在進行操作。
如果按支持材料形成的方式分,基于 scaffold 的培養(yǎng)體系可分為如下兩類,一種是將細胞分散在液體水凝膠中,然后通過交聯(lián)實現(xiàn) 3D 培養(yǎng),這類產(chǎn)品代表生產(chǎn)商包括 Cellendes, Matrigel, Glycosan Biosystems 和 QGel 等;另外一種是將細胞「播種“在 3D 基質(zhì)上,這類方法的代表廠商包括 3D Biotek, Alvetex 和 AlgiMatrix 等。本公司在江蘇省成立之后,發(fā)展迅速,本著雄厚的技術實力,不斷積累創(chuàng)新先進技術。第l一種方式中的 Cellendes 產(chǎn)品上面已經(jīng)做了簡要介紹