【廣告】
核酸試劑盒
側(cè)向流檢測(cè)試紙條作為一種能夠快速、方便、簡(jiǎn)單、無(wú)需人員和大型儀器設(shè)備操作的 一種檢測(cè)核酸的POCT方法,已經(jīng)在臨床診斷,環(huán)境監(jiān)測(cè)和食品安全等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用研究。
為便于現(xiàn)場(chǎng)可視化檢測(cè),本產(chǎn)品采用了FAM(FITC) -生物素報(bào)告基因進(jìn)行層析檢測(cè)。陰性樣品中,金??股锼嘏c高濃度FAM(FITC) -生物素報(bào)告基因充分結(jié)合,結(jié)合物在對(duì)照Control條帶被抗FAM (FITC)攔截。對(duì)于陽(yáng)性樣本,F(xiàn)AM(FITC) -生物素報(bào)告基因被裂解,金粒抗生物素的偶聯(lián)物生物素在檢測(cè)條帶積累,而在對(duì)照條帶積累減少。
RPA技術(shù)主要依賴于三種酶:能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,反應(yīng)溫度在37°C左右。
重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會(huì)發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動(dòng)DNA合成,對(duì)模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合,防止進(jìn)一步替換。在這個(gè)體系中,由兩個(gè)相對(duì)的引物起始一個(gè)合成事件。整個(gè)過(guò)程進(jìn)行得非???/span>,一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴(kuò)增產(chǎn)物。RPA擴(kuò)增的基礎(chǔ)體系(TwistAmp? Basic)含有DNA擴(kuò)增所需的所有試劑,我們只要準(zhǔn)備好引物和模板就行。擴(kuò)增結(jié)果可以通過(guò)凝膠電泳進(jìn)行終點(diǎn)檢測(cè),產(chǎn)物純化后可用于下游研究。
在這個(gè)基礎(chǔ)體系中添入不同的酶和探針,就可以實(shí)現(xiàn)多樣化的RPA應(yīng)用。舉例來(lái)說(shuō),TwistAmp? exo結(jié)合了exo探針技術(shù)和核酸外切酶III,能實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)的實(shí)時(shí)讀取,就像熒光定量PCR一樣。不過(guò)反應(yīng)終點(diǎn)的擴(kuò)增子總量有所減少,適合獲得強(qiáng)熒光信號(hào)進(jìn)行動(dòng)力學(xué)分析,不適合終點(diǎn)檢測(cè)(比如跑膠)。將exo探針技術(shù)、核酸外切酶III和逆轉(zhuǎn)錄酶結(jié)合起來(lái),可以一步實(shí)現(xiàn)RNA模板的實(shí)時(shí)擴(kuò)增。
等溫核酸試劑盒
側(cè)向流分析(LFIA)具有成本低、響應(yīng)快、易于使用和高通量等優(yōu)點(diǎn)。但LFIA與其他分析方法相比靈敏度較低,限制了其在不同領(lǐng)域的實(shí)際應(yīng)用。進(jìn)而迫切需要一種新的標(biāo)記分子,不僅易于合成,而且在信號(hào)產(chǎn)生和放大方面具有的物理/化學(xué)性質(zhì)。普魯士藍(lán)納米粒子(PBNP)具有良好的生物相容性和其它的性質(zhì),如低成本、高表面體積比、易于合成和表面改性等,一直受到生物醫(yī)學(xué)研究者的廣泛關(guān)注。
“強(qiáng)烈推薦CT影像作為目前新冠的診斷方法”,她表示,“病毒核酸檢測(cè)是確診新型冠狀病毒無(wú)創(chuàng)診斷的金標(biāo)準(zhǔn),然而檢測(cè)結(jié)果‘CT陽(yáng)性、核酸陰性’的結(jié)果,可能影響臨床排查。目前新型冠狀病毒核酸檢測(cè)特異性高、敏感性偏低,不排除存在部分假陰性?!?
在現(xiàn)實(shí)中,也出現(xiàn)了核酸試劑盒檢測(cè)數(shù)次陰性,卻確診為新冠的案例。