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體系簡介在生物復雜樣品分析中，高靈敏的 API5000三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀 API 5000 LC/MS/MS系統(tǒng)具有寬廣的線性動態(tài)范圍，并能定量、分析，適用于復雜基質(zhì)中低濃度組分的定量分析，比行業(yè)標準 API 4000系統(tǒng)具有更高的靈敏度。用來定量測定小分子化合物，可提供準確、重復性。為滿足 DMPK和 ADME研究的靈敏度要求， API 5000系統(tǒng)安裝了新的離子導入聚焦裝置、技術(shù)完善的 Turbo V離子源，以及新一代的 Analyst軟件，形成了適合于開發(fā)研究各個階段的經(jīng)用、高通量分析的平臺。制度優(yōu)勢

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制度優(yōu)勢QJetVTM離子導入技術(shù)、 TURBO VTM離子導入技術(shù)、 TURBOVTM離子源、新一代 Analyst軟件，使之成為適用于開發(fā)的每一階段的高通量分析平臺，除交叉污染 QJet離子導入技術(shù)外，通過捕獲和聚焦多由 TURBO離子源產(chǎn)生的離子，顯著提高了靈敏度。在高濃度樣品中， TURBO V離子源甚至可以消除交叉污染。它具有離子源和 APCI兩個接口，對于液相運行的每一個化合物，都可以通過計算機控制來優(yōu)化離子化參數(shù)。另外還可選擇大氣壓光電離 PhotoSpray源，增加了分析的可能性。一套無人值守 API 5000系統(tǒng)繼承了 AB SCIE耐用、可靠的三重四極桿技術(shù)，自動化特性使得它能在法規(guī)高通量實驗室中持續(xù)高負荷地工作。

聯(lián)用的定量經(jīng)驗：1、要用目標離子的碎片定量，特征性強，排除干擾；2、在定量分析方法設置上，盡可能提高掃描速度，提高準確率和重復性(通過 a減少掃描質(zhì)量數(shù)的范圍，可增加目標峰的掃描次數(shù)，或?qū)⒁粋€樣品全部分析時間斷分為 n個 segments，對目標離子單獨設置掃描模式)；3、經(jīng)色譜柱分離后，一定要進行定量分析，避免競爭性離子的存在影響目標離子的離子化效率；如果目標分子沒有從競爭分子中完全分離，則使目標分子的離子化效率降低，造成樣品分子的定量結(jié)果偏低，當然標準濃度樣品也應采用同樣的方法進行分析。4、如果樣品全部是純品，無需通過色譜柱直接進樣分析，包括做標準曲線的樣品(盡管不推薦直接進樣分析)。5、如果所用的離子源的噴針位置是可移動的，一定要記得在做標準曲線時做其位置，否則其位置移動后在相同條件下進入質(zhì)譜的離子流量會發(fā)生變化，標準曲線就不能使用了！不改變 shealthgas和 auxgas的流速，否則對進入質(zhì)譜的樣品數(shù)量都會產(chǎn)生影響，這將影響到質(zhì)譜的樣品數(shù)量。

建立的標準曲線一個月后，如要重復使用，就用 QC樣品來檢驗標準曲線！7、對掃描范圍、流動相組成、梯度、流速等方面不做任何改動，否則應重做標準曲線。目標峰掃描次數(shù)、流動相組成改變了離子化效率，流速改變了色譜峰的保留時間和峰寬。離子阱的優(yōu)點在于多層-定性層，而四級柱的強項在于量化；對熱穩(wěn)定性差的樣品，增加氣速，降低毛細管溫度，保證定量的重現(xiàn)性，一旦該方法固定后，不要輕易改變。

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柱材的選擇應根據(jù)待分析的樣品性質(zhì)和試驗條件確定。若要分析的樣品易分解或有腐蝕性，應考慮使用玻璃管或聚四氟乙烯管。玻璃管柱的優(yōu)點是化學惰性好，制備的柱子柱效高，便于觀察柱子的填充，而玻璃管易碎是其缺點。PTFE管的優(yōu)點是耐腐蝕，缺點是不耐高溫高壓。目前填充柱中通常采用 zui不銹鋼管。其優(yōu)點是不破碎，傳熱性好，柱壽命長，可滿足一般樣品分析要求。其缺點是內(nèi)壁較粗糙，活性較大，很難清洗干凈。

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在使用前應對填充柱進行清洗處理，并進行試漏檢測。清潔方法與管柱材料有關(guān)。對不銹鋼管，一般采用10%熱浸泡，抽去管內(nèi)壁的油污，再用自來水洗凈。若使用1:20的稀鹽酸溶液重復處理，則可明顯降低對柱內(nèi)壁的吸附。玻璃柱子的清潔可參考上述方法，不同的是一般用洗液浸泡。類似地，為了降低玻璃的內(nèi)壁活性，可用5%二二氯硅i烷的溶液浸漬處理，然后用和分別洗凈。氣柱檢漏方法比較簡單：可將柱子泡在水中，堵死柱的一端，在另一端通氣，若無氣泡冒出，則說明柱子無泄漏現(xiàn)象。

固相萃取柱：固相萃取是一種應用廣泛、廣受歡迎的樣品前處理技術(shù)，它是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標化合物吸附、與樣品基體及干擾物分離，再用洗脫液洗脫或加熱解吸附，達到分離富集目標化合物的目的。這種方法是在傳統(tǒng)的液-液萃取基礎上，結(jié)合目前廣泛使用的液相色譜和氣相色譜固定相的基礎知識，利用物質(zhì)相似作用的相似相溶原理開發(fā)出來。

固相萃取柱提取工藝：

在樣品提取前，要用一整管溶劑沖洗試管，以潤濕固相萃取柱填料。反相型硅膠和非極性吸附介質(zhì)，通常用水溶性有機i溶劑如甲i醇預處理，然后用水或緩沖溶液。在甲i醇濕吸附劑的表面和滲透性結(jié)合的烷i基相上，使硅膠表面的潤濕效率更高。有時候預處理溶劑在甲i醇之前使用。這類溶劑通常和洗脫溶劑類似，主要用于去除固相萃取管中的雜質(zhì)，以及它們對分析物的干擾，也可能是只溶于強洗脫溶劑。

正相型固相萃取硅膠和極性吸附劑介質(zhì)，通常對樣品所在的有機i溶劑進行預處理。在樣品加入去離子水或低濃度的離子緩沖溶液中進行預處理，在非極性有機i溶劑中使用離子交換填料，在樣品加入前應保證萃取柱保持濕潤。樣品加入前，在萃取柱中干燥填充后，重復進行預處理過程。再引入有機i溶劑前，用水沖洗緩沖液中的鹽份。