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以下列出了一些色譜柱的清洗溶劑和順序，作為參考：以正已烷(或庚烷)、和的硅膠柱依次沖洗，然后按相反的順序沖洗，所有的溶劑必須嚴格脫水?？梢郧逑吹魵埩舻膹姌O性雜質，并對硅膠表面進行活化。反相柱用水、、、(或)依次沖洗，然后按反序沖洗。若下一步分析所用的流動相不含緩沖液，就可以忽略一步用水沖洗?？上慈埩舻姆菢O性雜質，多次在()沖洗時多次注射100-200μ l四氫，有助于去除強疏水性的雜質。四氫與或混合溶液可去除類脂。有時候還要注射幾次二甲砜。用0.1%的、、三梯度洗脫可去除蛋白質污染。用稀酸緩沖洗陽離子交換柱，用稀堿緩沖液沖洗，把交換性能很強的鹽去掉，再用水、、(除去固定相表面吸附的有機物)、、水，依次沖洗。

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保存色譜柱時，柱中應充滿或，柱連接處應緊固，防止溶劑揮發(fā)干燥。請勿將緩沖液留在柱內待一夜或更久。8、在使用色譜柱時，如果壓力升高，有一種可能是燒結過的濾片被堵塞，此時應更換濾片或取出清洗；還有一種可能是大分子進入柱內，使柱頭受到污染；如果柱效降低或色譜峰變形，可能會出現(xiàn)柱頭塌陷，體積增大。當出現(xiàn)后兩種情況時，小心將柱頭接頭擰開，用潔凈的小鋼將柱頭填料取出1~2 mm的高度(注意將污染的填料取凈)再將柱內填料整平。接著將其填充到色譜柱中，用合適的溶劑潤濕固定相(與柱相同)，壓平，然后擰緊柱接頭。這種處理后柱的效能有所提高，但難以恢復到新柱水平。柱失效一般為柱端，在分析柱前安裝與分析柱相同固定相的短柱(5-30毫米)，可起到保護、延長柱壽命的作用。使用保護柱會失去一些柱效，這是值得的。

色譜柱一般用硅膠作基質，只能在pH2-9的范圍使用。柱使用一段時間后，可能會有一些吸附作用強的物質留在柱頂，尤其是一些有色物質更容易在柱頂?shù)奶盍仙峡吹?。在使用一段時間后，新的柱頂填料會塌陷，使柱效降低，此時還可補加填料，使柱效恢復。如 ODS柱，在每次工作結束后用強力洗脫劑，如 ODS柱，以沖洗到基線平衡。用鹽緩沖液作流動相時，用完后用無鹽流動相沖洗。含有鹵族元素的化合物(氟、氯、)可能對不銹鋼管道造成腐蝕，不適合長時間接觸。HPLC儀柱式安裝如果不經常使用，應每4-5天開一次電源，沖洗15分鐘。

探測器的維護1.光源部分探測器的重要組成部分是光源，光源對發(fā)射能量有要求，一旦能量衰減到一定程度，就會出現(xiàn)一系列影響光源使用的問題，如基線噪聲變大、靈敏度下降等。一般 UV燈的使用壽命為2000 h，當達到這一時，我們就特別注意燈的能量狀況，可通過儀器維護軟件中自帶的“燈能測試”功能判斷，測試結果將分別評估低、中、高三個波長段的能量，一旦某一波長段測試結果顯示失敗，就表示需要更換燈。2.檢測池探測器的另一個重要組成部分就是檢測池，也稱為循環(huán)池。一般來說，檢測池是大家比較關心的問題之一，因為檢測池的耐壓能力一般都不高，所以一旦被堵住，很容易造成損壞。實際上，檢測池一般不太容易堵塞，因為幾乎所有的顆粒雜質都會被色譜柱截獲，因此堵塞檢測器的東西基本不是來自樣品，很可能是后來“產生”，例如，含鹽流動相殘留在檢測池中導致鹽析出。六、廢液處理LC廢液中大部分含有，對人體有一定的危害，對環(huán)境也會造成污染，嚴禁隨意傾倒，應及時處理。當前，國內大多數(shù)實驗室都是把廢液運往廢液處理站進行無害化處理。

從脫氣機出來的流動相進入高壓泵許多情況下，泵的問題都反映在壓力上，壓力波動是常見的一類問題，泵的正常壓力波動一般在2%以內，這個異常波動通常是由于氣泡和鹽引起的：如果流動相中的氣泡沒有被脫氣機除掉，那么就會引起壓力波動，通常我們可以通過重新 purge流和再脫氣流來解決。由于鹽引起的波動，主要是由于流動相中添加了濃度較高的緩沖鹽，在含鹽流動相和有機相中，鹽會發(fā)生微小的析出，從而引起壓力異常波動，解決這些問題可以考慮適當降低鹽的濃度，或者用代替有機相。若因各種原因必須使用此流動相，可考慮在有機相中加入一定比例的水，然后適當提高梯度結束點。

替代流動相的過程有時會發(fā)生在泵的使用過程中，取代流動相是指取代正相溶劑，或反過來取代溶劑的過程，這個過程重要的是與流動相的兼容性，常用的正反相色譜溶劑是不可互溶的，所以在更換中間，一定要用異沖洗系統(tǒng)，保證管路中所有原有的溶劑都被異取代。流程繼續(xù)進行進樣，進入進樣器，進樣器分為手動和自動兩類。