等溫核酸試劑盒

核酸試劑盒的原理

核酸檢測，其實(shí)就是通過檢測熒光信號的累積來確定樣本中是否有病毒核酸?，F(xiàn)在核酸檢測試劑盒（多重?zé)晒釸T-PCR法），能夠?qū)崿F(xiàn)一小時(shí)快速診斷。

根據(jù)銳科技發(fā)布的文章《如何進(jìn)行核酸檢測帶你揭秘全過程》，目前的病毒核酸檢測試劑盒，多數(shù)采用熒光定量PCR方法。檢測原理是以病毒的基因序列為檢測靶標(biāo)，通過PCR擴(kuò)增，使我們的選擇這段靶標(biāo)DNA序列指數(shù)級增加，每一個(gè)擴(kuò)增出來的DNA序列，都可與我們預(yù)先加入的一段熒光標(biāo)記探針結(jié)合，產(chǎn)生熒光信號，擴(kuò)增出來的靶基因越多，累計(jì)的熒光信號就越強(qiáng)。

如何提高擴(kuò)增曲線的可重復(fù)性?

優(yōu)化擴(kuò)增曲線考慮以下因素: 對于低拷貝數(shù)模板，不穩(wěn)定擴(kuò)增可能是因?yàn)檫_(dá)到檢測限或者是反應(yīng)混勻程度不同（未混勻的反應(yīng)擴(kuò)增效率不佳）。另外，在低溫情況下存貯，重組酶和輔助蛋白在50%甘油情況下形成沉淀,也是可能導(dǎo)致不穩(wěn)定擴(kuò)增的原因。所以，20x核心反應(yīng)mix在室溫下解凍并震蕩渦旋將使其成為液體，不影響其功能,并且有效提高擴(kuò)增效率。不穩(wěn)定擴(kuò)增也可能是因?yàn)閙aster mix量不足，在加入體系前，用戶必須保證震蕩后20x核心反應(yīng)組分均一。

近年來，等溫?cái)U(kuò)增方法的發(fā)展讓基因檢測得以擺脫熱循環(huán)儀器的使用，因此更加便捷化?；诘葴?cái)U(kuò)增方法，多種具有POCT潛力的SARS-CoV-2檢測技術(shù)得以開發(fā)出來。特別是結(jié)合CRISPR技術(shù)后，檢測的特異性和靈敏度得到了進(jìn)一步提升。盡管如此，幾乎所有這些報(bào)道的技術(shù)僅僅證明了其在單基因檢測中的應(yīng)用。然而，臨床認(rèn)可的金標(biāo)準(zhǔn)方法，如RT-qPCR，通常需要檢測兩個(gè)基因。因?yàn)殡p基因檢測能夠有效地避免因基因部分降解，基因拷貝數(shù)差異和擴(kuò)增錯(cuò)誤等引起的潛在假陰性結(jié)果。

距離新冠疫情發(fā)生已經(jīng)近4個(gè)月了，不少科研工作者都積極投身到了新冠的相關(guān)研究當(dāng)中……

試紙條是一款基于側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)和膠體金標(biāo)記技術(shù)的即用型快速檢測試紙條。該款試紙條可用于蛋白、基因擴(kuò)增產(chǎn)物（PCR，LAMP，RPA）的定性/半定量檢測。研究者需要自行設(shè)計(jì)分別標(biāo)記有生物素的特異性檢測物（如抗原、探針）和標(biāo)記有FITC的特異性檢測物（如探針）。