在Tris的使用中，需要注意：Tris緩沖液的pH值受溫度和濃度影響很大，因此在配制過(guò)程中要考慮使用環(huán)境。且來(lái)看看它在Bis-Tris, Tricine，TES，TAPS中如何發(fā)揮它的潛能的。因?yàn)門(mén)ris堿的堿性較強(qiáng)，所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液；對(duì)生物化學(xué)過(guò)程干擾很小，不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。需要注意的是THAM緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大，緩沖液稀釋十倍，pH值的變化大于0.1，而且易吸收CO2所以需要密封。THAM主要就是用于生物緩沖劑的，與用于的緩血酸胺有差異，需要加以區(qū)別。

Tris-HCl試劑桶裝。Tris、Tris鹽酸鹽、Tris-HCl緩沖溶液即用型pH值區(qū)別：1、Tris或Tris堿pH值為10-12，呈弱堿性；2、Tris鹽酸鹽pH值為4-6，呈弱酸性（有些產(chǎn)品為T(mén)ris與其鹽酸鹽的混合粉末，pH會(huì)有所上升）；3、Tris-HCl緩沖溶液通常是按一定的Tris與HCl比例配置好的即用型緩沖溶液，pH值取決于兩者比例，常用的有7.4,7.6,8.0,8.8等，一般呈近中性，偏弱堿性。

Tris緩沖液為弱堿性溶液，DNA在這樣的溶液中會(huì)被去質(zhì)子化，從而提高其溶解性，所以在核酸的溶解及核酸提取中一般也使用Tris緩沖液。需要注意的是，因其配置溶液時(shí)顯堿性，會(huì)吸收部分空氣中能生成碳酸的二氧化碳?xì)怏w，所以需要將盛裝Tris溶液的瓶蓋蓋嚴(yán)。另外Tris溶液對(duì)溫度敏感，每升高1度，pH值下降0.03，配置時(shí)需維持在室溫。

 總的來(lái)說(shuō)，TCEP是這三個(gè)還原劑中穩(wěn)定的，但它也是昂貴的。我通常在純化過(guò)程的緩沖液中添加DTT，在后保存酶液的緩沖液中添加TCEP。一般比較合理的還原劑濃度是5~10mM。基本上你要確保還原劑濃度要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于你的蛋白濃度。因?yàn)镈TT和巰在室溫下就會(huì)降解，所以需要將添加了還原劑的緩沖液處于低溫保藏，或者在使用時(shí)再添加還原劑。