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在選擇固相萃取機(jī)理時(shí)，應(yīng)根據(jù)目標(biāo)化合物和干擾物的性質(zhì)考慮采用哪種萃取機(jī)理，因?yàn)樵S多化合物同時(shí)具有多種功能基。例如：2-萘胺是一弱堿性化合物(pKa=4.16)，它在一定 pH條件下也可呈陽(yáng)離子態(tài)，同時(shí)它又具有疏水性和親水性的非極性官能團(tuán)。此時(shí)，應(yīng)根據(jù)樣品基質(zhì)的具體情況，選擇有利于從干擾物中分離目標(biāo)化合物的萃取機(jī)理。當(dāng)樣品基質(zhì)中同時(shí)含有大量非極性干擾雜質(zhì)時(shí)，應(yīng)盡量避免采用非極性萃取機(jī)制，而應(yīng)采用以 pKa以下兩個(gè) pH單位或以 pH=2.16為限的陽(yáng)離子交換機(jī)制。相反，如果樣品中同時(shí)含有大量干擾雜質(zhì)陽(yáng)離子，則應(yīng)調(diào)整樣品 pH值至6.16 (比 pKa 2單位高)，采用非極性萃取機(jī)制更為有利。

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骨架形狀，粒徑，孔徑

硅的基質(zhì)形態(tài)一般可分為非晶態(tài)和球態(tài)。無(wú)定型C18材料具有較高的性能價(jià)格比，是初步提純的首1選。且C18具有較好的顆粒均一性、較高的柱效和分離性，但相對(duì)價(jià)格可能稍高，可作為精制的選擇。

現(xiàn)在市場(chǎng)上可供選擇的填料粒徑很多，中低壓備通常是為了增大上樣量，增加流速，減小壓力而選用大粒徑填料；由于可以達(dá)到較高的柱效，因此小粒徑填料更適合高1效液相或高壓制備。在選擇填料時(shí)還應(yīng)充分考慮孔徑，分子量小于5000 da時(shí)選擇孔徑(80~120 da)，而對(duì)于蛋白質(zhì)大分子分子量20000 da左右、分子量大于20000 da的樣品，通常不采用C18分離模式，采用 SEC等模式進(jìn)行分離。

廣州碩譜生物科技有限公司，反相SPE柱，是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。氧化鋁SPE柱批發(fā)

對(duì)正相體系，先對(duì)目標(biāo)化合物的正己烷溶液進(jìn)行上樣，然后用5%、10%、20%、30%、40%、60%、70%、80%、90%和的正己烷溶液對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行洗脫，分別收集洗脫液的分析結(jié)果，建立淋洗曲線，確定目標(biāo)化合物洗脫后的溶劑體系，淋洗后的甲1基叔丁基1醚含量應(yīng)略低于目標(biāo)化合物恰好被洗脫時(shí)的溶劑體系，而洗脫液中甲1基叔丁基1醚的含量應(yīng)略高于目標(biāo)化合物正好被洗脫時(shí)的溶劑體系。

合理處理 SPE柱，在 SPE柱中，吸附劑可能存在少量干擾物，有效活化可避免干擾物進(jìn)入洗脫液中，活化溶液應(yīng)選擇整個(gè)洗脫過(guò)程中洗脫強(qiáng)度zui高的溶劑體系。

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樣本制備問(wèn)題

大部分流速問(wèn)題是由于樣品制備不當(dāng)造成的。例如樣品混濁、離心過(guò)濾不充分造成上樣時(shí)篩板堵塞，或樣品本身的蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)處理不當(dāng)，造成有效蛋白沉降，造成篩板堵塞。通過(guò)改進(jìn)前處理方法，可解決由這種原因引起的流速問(wèn)題。因此，樣品準(zhǔn)備是保證 SPE正常流動(dòng)速度的di一步。

小柱子本身因素(填充尺寸和柱子體積)

充填粒徑的作用，大充填粒徑的充填越疏松，流動(dòng)相阻力越小，流速越快；小充填粒徑的作用，充填越緊，流速越慢。這一現(xiàn)象在弗羅里硅土和硅藻土小柱中都很明顯。小柱粒徑范圍一般為40-60 um，農(nóng)殘級(jí)弗羅里硅土的粒徑范圍為75-150 um，大柱粒徑范圍為600-900 um。因此弗羅里硅土和硅藻土小柱的流速會(huì)比一般小柱要快，特別是大孔硅藻土小柱，在使用時(shí)需要配以導(dǎo)流針來(lái)控制流速。

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固相萃取簡(jiǎn)單的方法是手工操作，即在固相萃取柱的上端連接一個(gè)，通過(guò)擠壓，將萃取柱中的液體排出萃取柱。也可采用正、負(fù)壓固相萃取裝置對(duì)批量樣品進(jìn)行固相萃取。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，樣品數(shù)量不斷增加，越來(lái)越多的分析實(shí)驗(yàn)室開(kāi)始采用自動(dòng)固相萃取儀器，尤其是采用多通道固相萃取儀器處理批量樣品。

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固體萃取柱通用工藝：

固相萃取簡(jiǎn)單的方法是手工操作，即在固相萃取柱的上端連接一個(gè)，通過(guò)擠壓，將萃取柱中的液體排出萃取柱。也可采用正、負(fù)壓固相萃取裝置對(duì)批量樣品進(jìn)行固相萃取。

隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，樣品數(shù)量不斷增加，越來(lái)越多的分析實(shí)驗(yàn)室開(kāi)始采用自動(dòng)固相萃取儀器，尤其是多通道固相萃取儀器來(lái)處理批量樣品。

(作用)：也稱為溶劑化，加入適當(dāng)?shù)娜軇刮絼┥系墓倌軋F(tuán)膨脹，并去除可能在吸附劑上出現(xiàn)的干擾，反相吸附劑通常使用中極性溶劑(如)，而正相吸附劑則使用弱極性或非極性溶劑(如己烷)。