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分析是現(xiàn)代生物分析技術(shù)中重要的一種方法,利用它可對(duì)蛋白質(zhì)、抗原、及細(xì)胞進(jìn)行定量分析。例如在檢測(cè)中,經(jīng)常用一些具有特殊物理化學(xué)性質(zhì)的標(biāo)記物如性同位素、酶、膠體金和有機(jī)熒光染料分子等對(duì)(或抗原)進(jìn)行偶聯(lián)標(biāo)記,在抗原、識(shí)別后,通過對(duì)標(biāo)記物的定性或定量檢測(cè)而達(dá)到對(duì)抗原(或)檢測(cè)的目的。由于磁性納米粒子具有超順磁性,為樣品的分離、富集和提純提供了很大方便,在檢測(cè)方面受到廣泛關(guān)注。
磁性納米粒子在體內(nèi)診斷方面的應(yīng)用主要用于成像。由于成像在診斷上的發(fā)展,出現(xiàn)了一類新型-磁性。這些給服用后的主要用途是提高正常和患病組織的對(duì)比度(造影劑)和/或顯示功能或血流情況。超順磁氧化鐵納米粒子在體外和體內(nèi)細(xì)胞和分子成像中成為一類新的探針。在中使用超順磁顯影劑具有產(chǎn)生比順磁的顯影劑更強(qiáng)的質(zhì)子弛豫的優(yōu)點(diǎn)。因而,需要注射到體內(nèi)的顯影劑劑量更少。然而,不便于進(jìn)行原位監(jiān)測(cè)。
洗脫不充分有時(shí)候我們裂解結(jié)合液各種條件優(yōu)化到了了,可是核酸得率仍然很低。這種情況有可能是磁珠結(jié)合了核酸,但是由于洗脫不充分,磁珠結(jié)合的核酸沒有被洗脫下來。首先,磁珠在晾干過程中可能干燥過度,導(dǎo)致核酸干結(jié)在磁珠上不能洗脫下來;第二,洗脫液體積過小導(dǎo)致無法充分洗脫。晾干過程中,需要觀察磁珠處于稍微濕潤(rùn)的狀態(tài)即可,不能完全干燥,這樣核酸更容易溶解于洗脫液中。洗脫體積不能太少也不能太多,太少磁珠上的核酸很難洗脫充分,太多會(huì)導(dǎo)致濃度偏低。一般來說 0.5mg 的磁珠,洗脫液的體積為 70-100ul。
核酸的高電荷磷酸骨架使其比蛋白質(zhì)、多糖、脂肪等其他生物大分子更具親水性,所以利用核酸的這一性質(zhì)結(jié)合親水性極強(qiáng)的硅羥基磁珠,可實(shí)現(xiàn)核酸與其他生物大分子的分離。硅羥基磁珠吸附核酸的原理,一般認(rèn)為利用緩沖液中帶正電的鈉離子在帶負(fù)電的核酸和帶負(fù)電磁性微球間充當(dāng)電橋作用,使得核酸磷酸骨架與磁性微球通過靜電作用和氫鍵作用相互吸附,從而可實(shí)現(xiàn)核酸的結(jié)合。但由于硅羥基表面的極強(qiáng)的親水性,所以在吸附核酸的同時(shí)也能少量吸附其他的親水性物質(zhì),所以必須配制相應(yīng)的洗滌液去洗去核酸以外的雜質(zhì)。