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微透析系統(tǒng)
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微透析技術(shù)具有連續(xù)取樣、動(dòng)態(tài)觀(guān)察、定量分析、采樣量小、組織損傷輕等特點(diǎn)??稍诼榛蚯逍训纳矬w上使用, 特別適合于深部組織和重要器的活生化研究。 目前已成為實(shí)驗(yàn)神經(jīng)生理學(xué)和神經(jīng)化學(xué)的重要研究工具之一, 它可提供遞質(zhì)釋放、攝取和代謝的必要信息。
微透析(Microdialysis)技術(shù)是一種將灌流取樣和透析技術(shù)結(jié)合起來(lái)并逐漸完善的一種從生物體內(nèi)進(jìn)行動(dòng)態(tài)微量生化取樣的新技術(shù)。
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目前測(cè)定回收率的方法主要有以下幾種:1,外標(biāo)法計(jì)算被測(cè)物質(zhì)相對(duì)濃度的變化時(shí), 可簡(jiǎn)單地采用體外回收率法。測(cè)定宜在取樣后立即進(jìn)行, 將探針?lè)湃胍阎獫舛鹊臉?biāo)準(zhǔn)溶液中, 用與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)相同的流速灌流探針。達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)后收集灌流液并進(jìn)行檢測(cè)。測(cè)定濃度與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度之比就是體外回收率。此法雖簡(jiǎn)單易行, 但由于被測(cè)物質(zhì)在體外時(shí)與體內(nèi)的環(huán)境狀況不同, 檢測(cè)結(jié)果不能?chē)?yán)格地等同于實(shí)際的回收率。2,內(nèi)標(biāo)法往灌流液中加入已知濃度且性質(zhì)與被分析物質(zhì)相似的另一種物質(zhì)做內(nèi)標(biāo),內(nèi)標(biāo)物不僅在擴(kuò)散性質(zhì)上與被分析物一致,而且還要在體內(nèi)的代謝過(guò)程中也盡可能一致,測(cè)出透析率即作為被分析物的回收率。CMA主要原理為將一種具有透析作用的微細(xì)探針置于采樣的生物組織內(nèi),利用一部非常精細(xì)的注射泵,推送溶液至探針處,以達(dá)到與組織內(nèi)欲取出測(cè)量的低分子量物質(zhì),進(jìn)行透析交換,再將透析液做進(jìn)一步的分析。由于選擇內(nèi)標(biāo)的局限性很大, 限制了此法的應(yīng)用。3,反透析法假設(shè)被測(cè)物從兩個(gè)方向通過(guò)半透膜是同等的。在灌流液中加入一定濃度的內(nèi)標(biāo)物(Cic) ,在與體內(nèi)透析相同的條件下操作, 測(cè)定透析液中內(nèi)標(biāo)物的濃度(Cec) ,體內(nèi)回收率(Rin ,vivo ) 可用下式計(jì)算:Rin vivo = (1 Cec/ Cic) ×100 %本法要求內(nèi)標(biāo)物具有生物惰性, 盡可能與被測(cè)物相似。
微透析系統(tǒng)的詳細(xì)信息
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可同時(shí)收集一或兩個(gè)探針的透析液, 1X20或2X10個(gè)樣品,收集體積: 1 – 50μL,1μL增減,經(jīng)由CAD計(jì)算器軟件, 可與CMA 402微透析泵聯(lián)機(jī)使用。噪音小, 體積小, 避免干擾實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和過(guò)長(zhǎng)的管道連接。
CMA 主要原理為將一種具有透析作用的微細(xì)探針置于采樣的生物組織內(nèi),利用一部非常精細(xì)的注射泵, 推送溶液至探針處, 以達(dá)到與組織內(nèi)欲取出測(cè)量的低分子量物質(zhì), 進(jìn)行透析交換,再將透析液做進(jìn)一步的分析。
微透析系統(tǒng)的主要原理
微透析采樣系統(tǒng)主要原理是將一種具有半透膜的探針置于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的特定組織中, 利用泵推送溶液至探針處,從而使組織內(nèi)的目標(biāo)物質(zhì)通過(guò)半透膜擴(kuò)散到探針內(nèi),以達(dá)到從組織內(nèi)取出需要測(cè)量的低分子量物質(zhì),以便于進(jìn)一步的分析。這套設(shè)備可對(duì)或清醒的動(dòng)物進(jìn)行連續(xù)的灌流實(shí)驗(yàn), 為醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、生命科學(xué)等領(lǐng)域的發(fā)展提供了嶄新的技術(shù)。該技術(shù)的另一大優(yōu)點(diǎn)是樣品的采集與分析過(guò)程既可在位又可離位進(jìn)行。
應(yīng)用范疇:精神學(xué)、理及研究、動(dòng)態(tài)學(xué)及毒物學(xué)、生理學(xué)藥理學(xué)、生命胺分析、乙酰膽素/分析、自由基/氨基酸分析、各種組織生化/分析。
目前CMA的研究團(tuán)隊(duì)已正式將微透析技術(shù)運(yùn)用于臨床上,包含病患的監(jiān)護(hù),病患內(nèi)臟、移植,外在醫(yī)學(xué)美容等,對(duì)人類(lèi)疾病的研究上,也有許多貢獻(xiàn)。