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大鼠腦缺血再灌注模型
造模方法
大鼠麻zui仰臥固定于恒溫手術(shù)臺(tái)上。暴露頸總動(dòng)脈頸(CCA),分離頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)和頸外動(dòng)脈(ECA)。CCA近心端結(jié)扎并另備線,ICA遠(yuǎn)端放置微型動(dòng)脈夾,在CCA靠近分叉處插入魚線,即線栓由頸內(nèi)動(dòng)脈分叉處計(jì)長(zhǎng)度為1.85±0.05cm,說(shuō)明絲線頭端己到達(dá)ICA分支MCA以和大腦前動(dòng)脈(ACA)的分叉處,阻斷了同側(cè)ICA和經(jīng)ACA來(lái)自對(duì)側(cè)ICA的血供,缺血1h。
手術(shù)造模圖片
病理判定圖片
在醫(yī)學(xué)教學(xué)、科研和醫(yī)學(xué)工作中,不論是從事基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的還是臨床醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué),都需要用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)。通過對(duì)動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)的觀察和分析,來(lái)研究和解決醫(yī)學(xué)上存在的許多問題,動(dòng)物 實(shí)驗(yàn)方法 已成為醫(yī)學(xué)科學(xué)研究和教學(xué)工作中必不可少的重要手段。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法是多種多樣的,在醫(yī)學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域內(nèi)都有其不同的應(yīng)用,其中一些基本方法都是共同性的,如動(dòng)物的選擇、抓取、固定、、脫毛、給藥、采血、采尿、急救、處死、尸檢等,不管是從事何種課題的醫(yī)學(xué)研究都要用這套基本方法,因此,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本方法,已成為醫(yī)學(xué)科技工作者必須掌握的一項(xiàng)基本功。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分組
(一)分組的原則:進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí),經(jīng)常需要將選擇好的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按研究的需要分成若干組。動(dòng)物分組應(yīng)按隨機(jī)分配的原則,使每只動(dòng)物都有同等機(jī)會(huì)被分配到各個(gè)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組中去,以避免各組之間的差別,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,特別是進(jìn)行準(zhǔn)確的統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn),必須在隨機(jī)分組的基礎(chǔ)上進(jìn)行。
每組動(dòng)物數(shù)量應(yīng)按實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)短、實(shí)驗(yàn)類型及統(tǒng)計(jì)學(xué)要求而定。如果是慢性實(shí)驗(yàn)或需要定期處死動(dòng)物進(jìn)行檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn),就要求選較多的動(dòng)物,以補(bǔ)足動(dòng)物自然和認(rèn)為處死所喪失的數(shù)量,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)有合乎統(tǒng)計(jì)學(xué)要求的動(dòng)物數(shù)量存在。
(二)建立對(duì)照組:分組時(shí)應(yīng)建立對(duì)照組。1.自身對(duì)照組:是指實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)而言。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物本身在實(shí)驗(yàn)處理前、后兩個(gè)階段的各項(xiàng)相關(guān)數(shù)據(jù)就分別是對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,此法可排除生物間的個(gè)體差異。2.平行對(duì)照組:有正對(duì)照組和負(fù)對(duì)照組兩種。給實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物某種處理,而給正對(duì)照組用同樣方法進(jìn)行處理,但并不采用實(shí)驗(yàn)所要求的或手段,負(fù)對(duì)照組則不給任何處理。3.具體分組時(shí),應(yīng)避免人為因素, 隨機(jī)把所有的動(dòng)物進(jìn)行編號(hào),然后令其雙數(shù)為A組(實(shí)驗(yàn)組),單數(shù)為B組(對(duì)照組)即可或反之。如果要分若干個(gè)組時(shí),應(yīng)該用隨機(jī)數(shù)字表示進(jìn)行完全隨機(jī)分組。
根據(jù)GB19489-2004實(shí)驗(yàn)室 生物 安全通用要求,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的 生物 安全要點(diǎn):
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)設(shè)施應(yīng)參照BSL1-4實(shí)驗(yàn)室的要求,還應(yīng)考慮對(duì)動(dòng)物呼吸、排泄、毛發(fā)、抓咬、掙扎、逃逸、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)(如染毒、醫(yī)學(xué)檢查、取樣、解剖、檢驗(yàn)等)、動(dòng)物飼養(yǎng)、動(dòng)物及排泄物的處置等過程產(chǎn)生的潛在生物危害的防護(hù)。應(yīng)特別注意對(duì)動(dòng)物源性氣溶膠的防護(hù),例如對(duì)動(dòng)物的剖檢應(yīng)在負(fù)壓剖檢臺(tái)上進(jìn)行。
應(yīng)根據(jù)動(dòng)物的種類、身體大小、生活習(xí)性、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡冗x擇具適當(dāng)防護(hù)水平的、專用于動(dòng)物的、符合國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的 生物安全柜 、動(dòng)物飼養(yǎng)設(shè)施、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施、消毒設(shè)施和清洗設(shè)施等。
實(shí)驗(yàn)室建筑應(yīng)確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物不能逃逸,非實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物(如野鼠、昆蟲等)不能進(jìn)入。實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)(如空間、進(jìn)出通道等)應(yīng)符合所用動(dòng)物的需要。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室空氣不應(yīng)循環(huán)。動(dòng)物源氣溶膠應(yīng)經(jīng)適當(dāng)?shù)倪^濾/消毒后排出,不能進(jìn)入室內(nèi)循環(huán)。
如動(dòng)物需要飲用無(wú)菌水,供水系統(tǒng)應(yīng)可安全消毒。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的溫度、濕度、照度、噪聲、潔凈度等飼養(yǎng)環(huán)境應(yīng)符合國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求。