在醫(yī)學(xué)教學(xué)、科研和醫(yī)學(xué)工作中，不論是從事基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的還是臨床醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)，都需要用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)。通過對(duì)動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)的觀察和分析，來(lái)研究和解決醫(yī)學(xué)上存在的許多問題，動(dòng)物 實(shí)驗(yàn)方法 已成為醫(yī)學(xué)科學(xué)研究和教學(xué)工作中的重要手段。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法是多種多樣的，在醫(yī)學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域內(nèi)都有其不同的應(yīng)用，其中一些基本方法都是共同性的，如動(dòng)物的選擇、抓取、固定、、脫毛、給藥、采血、采尿、急救、處死、尸檢等，不管是從事何種課題的醫(yī)學(xué)研究都要用這套基本方法，因此，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本方法，已成為醫(yī)學(xué)科技工作者必須掌握的一項(xiàng)基本功。d-17d可以成功制作改良尼古J依賴戒斷大鼠模型,尼古J戒斷后大鼠疼痛敏感性加高。

營(yíng)養(yǎng)不良性gan硬化動(dòng)物模型

(1)fu制方法  離乳雄性大鼠，每日喂食缺乏dan堿的低蛋白高脂肪飼料8～10g，連續(xù)2～3個(gè)月。該飼料用酪蛋白或大豆作為蛋白來(lái)源，另加蔗糖、豬油、維生素粉、鹽和定量的L-胱酸而組成。造模過程中，每日觀察動(dòng)物的一般活動(dòng)狀況，每周稱量動(dòng)物體重，造模結(jié)束后抽取全血制備xue清、稱取部分肝組織制備勻漿作生化檢測(cè)，摘取一些qi官稱重，換算成臟器系數(shù)，并對(duì)肝組織進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)檢查。動(dòng)物模型的設(shè)計(jì)原則重復(fù)性理想的動(dòng)物模型應(yīng)該是可重復(fù)的，甚至是可以標(biāo)準(zhǔn)化的。

(2)模型特點(diǎn)  造模1個(gè)月時(shí)，約有20％動(dòng)物si亡，2個(gè)月時(shí)，動(dòng)物體重增長(zhǎng)停止，有fu水潴留、出血、脫毛等現(xiàn)象出現(xiàn)，巨檢可見典型的肝結(jié)節(jié)、脾腫大、腹shui潴留、yi腺腫大、gao丸萎縮等特有癥狀，有的還出現(xiàn)shen硬化，光鏡檢查顯示，造模初期，肝組織呈小結(jié)節(jié)性脂肪gan硬化，隨著飼育時(shí)闖的延長(zhǎng)，出現(xiàn)粗大的結(jié)節(jié)性或小葉性gan硬化。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物本身在實(shí)驗(yàn)處理前、后兩個(gè)階段的各項(xiàng)相關(guān)數(shù)據(jù)就分別是對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，此法可排除生物間的個(gè)體差異。

(3)比較醫(yī)學(xué)  膳食不平衡或特種營(yíng)養(yǎng)素缺乏可以導(dǎo)致動(dòng)物肝細(xì)胞病變。應(yīng)特別注意對(duì)動(dòng)物源性氣溶膠的防護(hù)，例如對(duì)動(dòng)物的剖檢應(yīng)在負(fù)壓剖檢臺(tái)上進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)證明，長(zhǎng)期喂食dan堿缺乏食物可誘發(fā)大鼠肝脂變、肝纖維化乃至gan硬化。本模型采用離乳大鼠是由于幼鼠在發(fā)育期階段對(duì)dan堿的需求量較大，因dan堿缺乏造成對(duì)機(jī)體傷害的敏感性自然比成年動(dòng)物更強(qiáng)。但事實(shí)上，對(duì)dan堿缺乏的敏感性取決于體內(nèi)dan堿氧化酶的含量。人類gan臟不含dan堿氧化酶，不存在dan堿缺乏問題，所以此模型不適于在發(fā)病機(jī)制上進(jìn)行人類相關(guān)疾病的研究。不過，該模型由于fu制周期長(zhǎng)，飼料配制復(fù)雜，花費(fèi)大，現(xiàn)已少見有單用此方法造模者。此外，實(shí)驗(yàn)中使用雄性動(dòng)物雄鼠是因?yàn)樾坌詣?dòng)物在向gan硬化轉(zhuǎn)化過程中比雌性動(dòng)物更為均一。在飼料中混入微量的半胱氨酸具有促進(jìn)gan硬化發(fā)展的作用。

睡眠剝奪模型

實(shí)驗(yàn)用金屬箱直徑35 cm， 每箱裝1只大鼠。但本模型(犬)在測(cè)定肺功能時(shí)表明，動(dòng)物呼氣流速的下降與靜態(tài)順應(yīng)性的下降不成比例，同時(shí)病理組織學(xué)也證實(shí)動(dòng)物氣道萎縮，氣道病變說明本模型不是單純性的較佳模型。REMSD 各組分別置于直徑為6.5 cm的小站臺(tái)上，對(duì)照組大鼠置于直徑15 cm的大站臺(tái)上，周圍是水環(huán)境,水深3 cm，平臺(tái)在水面以上1 cm，于平臺(tái)以上14 cm 處放籠罩，上面放水和食物。水溫和室溫保持在25 C，每日換水并打掃實(shí)驗(yàn)箱。REMSD 組大鼠在小臺(tái)上屈曲而立，在快動(dòng)眼睡眠(rapid eye movement sleep， REMS) 時(shí)，由于伴隨全身肌肉松弛和節(jié)律性垂頭，大鼠落入水中而驚醒，再爬上站臺(tái)。用此方法自18:00開始連續(xù)剝奪大鼠的REMS至相應(yīng)實(shí)驗(yàn)時(shí)間點(diǎn)。

 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)( open field test， OFT )

實(shí)驗(yàn)裝置為高60 cm、 底面邊長(zhǎng)100 cm、內(nèi)壁涂黑的無(wú)蓋方箱，底面平均分為25個(gè)小方格，正上方2 m處架一攝像機(jī)，鏡頭對(duì)準(zhǔn)箱底，實(shí)驗(yàn)在安靜環(huán)境下進(jìn)行，大鼠置于方箱底面中心，同時(shí)進(jìn)行攝像和計(jì)時(shí)，3 min 后停止攝像,更換動(dòng)物后，繼續(xù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。此時(shí)，動(dòng)物將作為人體的代替者或模型來(lái)使用，而對(duì)構(gòu)造上、機(jī)能上所表現(xiàn)的種間異同問題，應(yīng)從比較生物學(xué)方面去了解。2次實(shí)驗(yàn)之間清洗箱壁及底面，以免上次動(dòng)物余留的信息影響下次實(shí)驗(yàn)結(jié)果。計(jì)分方法:通過放像設(shè)備，觀察大鼠3 min內(nèi)越過的格子數(shù)為水平得分，后肢站立次數(shù)為垂直得分，兩者之和為OFT總得分。REMSD實(shí)驗(yàn)前后均進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)。

Y迷宮實(shí)驗(yàn)幾種常見的行為學(xué)測(cè)試方法

1、Y迷宮（Y-Maze）交替行為測(cè)試原理

Y-迷宮由Dellu F等發(fā)明，被廣泛應(yīng)用于功能減退、趨向性、空間工作記憶等研究領(lǐng)域。此方法屬于腹膜炎攻擊方法的一種，主要是通過手術(shù)方式將小鼠自身盲腸內(nèi)容物釋放到腹腔造成gan染，從而模擬膿毒癥的發(fā)生和發(fā)展。Y迷宮主要用于研究嚙齒類動(dòng)空間工作記憶，其完全是利用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)新異環(huán)境探索的天性，由于動(dòng)物每次轉(zhuǎn)換探索方向時(shí)都需要記住前一次探索過的方向，因此Y型迷宮實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蛴行У販y(cè)定動(dòng)物的空間工作能力。

1.1  Y迷宮交替行為測(cè)試及參數(shù)

  自制Y迷宮，由3等長(zhǎng)臂組成（50cm×18cm×35cm），每?jī)蓚€(gè)臂之間夾角為

120度，在中央處各有一個(gè)可移動(dòng)的隔板，迷宮內(nèi)臂及底部均涂為黑色。髓磷脂特異性T細(xì)胞在外周被ji活，穿過血腦屏障進(jìn)入zhong樞神經(jīng)系統(tǒng)并被重新ji活，引發(fā)一系列yan癥反應(yīng)，導(dǎo)致脫髓鞘和軸突細(xì)胞凋亡，zui終導(dǎo)致神經(jīng)損傷和失去功能。參照文獻(xiàn)實(shí)驗(yàn)操作方法并加以改進(jìn)，將大鼠放在Y迷宮任意一臂末端，任其自由探索8min，攝像系統(tǒng)記錄動(dòng)物8min的行為變化，記錄以下各項(xiàng)指標(biāo)：①總進(jìn)臂次數(shù)（the total number of entries）：動(dòng)物進(jìn)入迷宮臂的次數(shù)（以大鼠四只腳均進(jìn)入臂為進(jìn)臂一次標(biāo)準(zhǔn)）；②輪流（交替）一次（an alternation）：依次連續(xù)進(jìn)入Y迷宮全部三個(gè)臂一次。③*大輪流次數(shù)（The number of maximum alternati）：總進(jìn)臂次數(shù)-2。自發(fā)輪流行為得分=總輪流次數(shù)/*大輪流次數(shù)*100%。