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應(yīng)用過(guò)程中的液相色譜四個(gè)關(guān)鍵因素1、液相色譜儀本身：通常儀器本身是沒(méi)有問(wèn)題的，尤其是新買(mǎi)回來(lái)的儀器。就儀器本身而言，重要的是儀器的檢驗(yàn)，新買(mǎi)回來(lái)的儀器一般都是由賣(mài)方先對(duì)儀器做系統(tǒng)的確認(rèn)工作(包括 IQ、 PQ、 OQ)，確認(rèn)順利通過(guò)后，再請(qǐng)國(guó)家或省級(jí)儀器檢定局的來(lái)校驗(yàn)，檢定合格后再用，檢定合格后再用，除此之外，還可以放心使用，此外，還可為儀器的正常使用提供保障。2、色譜條件：通常的色譜條件包括流動(dòng)相、色譜柱、檢測(cè)波長(zhǎng)、流速和進(jìn)樣量。移動(dòng)相是指在制備流動(dòng)相所用水和試劑試液時(shí)，水的電阻率一般不超過(guò)18.2兆歐，而水的電阻率不超過(guò)18.2兆歐，其原因是為了防止水和試劑試液中雜質(zhì)對(duì)色譜結(jié)果的干擾，測(cè)試液采用色譜級(jí)別。

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③先用溶劑將檢測(cè)池沖洗，具體用哪種具體的試樣而定；若沖了還不行，把檢測(cè)池卸下來(lái)，看燈能量，若能量還可以(有個(gè)幾千)，可能得清洗光路。首先還是請(qǐng)工程師來(lái)清洗，因?yàn)橐謇淼牧慵谔綔y(cè)器下面有一個(gè)黑色的碎片，中間有一條縫，而且那一塊的螺絲都是八角的，卸起來(lái)很麻煩。④拿出5個(gè)樣品盤(pán)，可以看到里面有一個(gè)黑色凸起(看不清是用電筒)，平時(shí)進(jìn)樣針就是從那個(gè)地方吸的。伸手就能卸下來(lái)，里面有一個(gè)小白圈(用多了自然就黑了)，換一個(gè)新的就好了，一般只有10個(gè)才能買(mǎi)儀器。

在實(shí)際應(yīng)用中，有幾點(diǎn)需要注意：(1)流動(dòng)相過(guò)濾在實(shí)際操作中由于不可能做到專(zhuān)瓶，容易造成交叉污染，對(duì)于復(fù)雜的配比流動(dòng)相影響較大。因此，使用后一定要用水沖洗。在使用之前不放心的話(huà)也可以清洗。(2)流動(dòng)相過(guò)濾經(jīng)濟(jì)成本較高。購(gòu)買(mǎi)一套濾芯要3000多元，而且濾芯是比較容易損壞的設(shè)備。過(guò)濾器成本高，有的進(jìn)口一片就要幾十元。按照普通液相柱的正常使用壽命計(jì)算，過(guò)濾片的成本將遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于色譜柱。而且在使用過(guò)濾片時(shí)，有些會(huì)引起流動(dòng)相二次污染，原因是濾片不合格。(3)流動(dòng)相過(guò)濾耗時(shí)較長(zhǎng)。對(duì)于溶劑過(guò)濾器，有一個(gè)預(yù)清洗、安裝、使用、使用后清洗、烘干的過(guò)程，也至少要有一個(gè)小時(shí)。這一代價(jià)也不容忽視。

造成堵塞的原因之二：使用流動(dòng)相時(shí)細(xì)菌污染。指出：剛開(kāi)始流動(dòng)相無(wú)長(zhǎng)菌性細(xì)菌，在使用中產(chǎn)生細(xì)菌污染。在使用多元液相色譜儀時(shí)，這主要是一個(gè)不健康的使用習(xí)慣。舉例來(lái)說(shuō)：50%流動(dòng)的流動(dòng)相，有兩種使用方法。一種方法是在上機(jī)之前把水混合在一起，另一種方法是在流路 A放純，而流路 B放純水。就單純的實(shí)驗(yàn)效果而言，后一種具有明顯的優(yōu)勢(shì)：一是簡(jiǎn)單，無(wú)需另一種計(jì)算比例混合，二是比例，可以得到保留時(shí)間的重復(fù)性的實(shí)驗(yàn)效果。但它有一個(gè)致命的缺點(diǎn)，就是純水在流動(dòng)相瓶中存活數(shù)天(許多情況下，不僅用純水作為流動(dòng)相，而且用緩沖鹽溶液，本身就是的肥料，細(xì)菌生長(zhǎng)得更快)，一旦出現(xiàn)細(xì)菌柱子，就會(huì)迅速分解。這樣就要求操作者每次實(shí)驗(yàn)都要用新配制的純水，更要求每次實(shí)驗(yàn)后要換水，換成沖洗干凈，這點(diǎn)在實(shí)際工作中很多人意識(shí)不強(qiáng)，但在多次使用中總有一兩次會(huì)漏掉，但往往這一兩次就足以產(chǎn)生致命的影響。由于液相色譜柱的堵塞是不可逆的。

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氣相色譜儀常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法

  1、進(jìn)樣后不出色譜峰的故障

進(jìn)樣后，氣相色譜儀檢測(cè)信號(hào)無(wú)變化，儀不出峰，輸出為直線(xiàn)。如果出現(xiàn)此情況，應(yīng)逐個(gè)檢查從進(jìn)樣針、進(jìn)樣口到探測(cè)器的順序。

首先要檢查注i射器有沒(méi)有堵塞，如果沒(méi)有問(wèn)題，

2、再次檢查進(jìn)樣口和檢測(cè)器石墨墊圈是否緊固、不泄漏，

3、再檢查一下色譜柱，看有無(wú)破i裂漏氣現(xiàn)象，

4、觀察 zui后，觀察探測(cè)器出口是否暢通。

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5、檢測(cè)器的出口通暢非常重要，有人在工作時(shí)會(huì)遇到這樣的問(wèn)題：前一天儀器工作一切正常，第二天開(kāi)機(jī)后卻沒(méi)有響應(yīng)峰信號(hào)。進(jìn)樣口、注i射器、墊圈、色譜柱均正常，可不小心出峰，偶然發(fā)現(xiàn)進(jìn)樣口柱頭壓力達(dá)不到設(shè)定值，總是偏高，此時(shí)，才懷疑是 ECD檢驗(yàn)器出口不暢。E C D的排放物具有一定的放i射性，故出口 E C D可引至室外。那時(shí)正是秋冬之交，雨水進(jìn)入 E CD排出口后，凍結(jié)，從而造成儀器 E CD出口阻塞，柱頭壓力居高不下，氣體無(wú)法在氣路中流動(dòng)，無(wú)法將樣品送到檢測(cè)器，所以不能將樣品送到檢測(cè)器，所以不能出峰。

不完全分離

①一些峰相重疊，不能分開(kāi)。治理措施：降低載風(fēng)量，減少進(jìn)樣量，降低柱溫。對(duì)能原能完全分離，用一段時(shí)間后便不能完全分離，說(shuō)明固定液流失了，柱子壽命已長(zhǎng)，需要更換固定液。②過(guò)長(zhǎng)的分離時(shí)間導(dǎo)致晚餾出的峰變平。處置：可通過(guò)升高柱溫來(lái)解決。③檢測(cè)器靈敏度太低，無(wú)法檢測(cè)含有少量成分的成分。解決辦法：可增加進(jìn)樣量，提高檢測(cè)器靈敏度等方法。

五峰形不規(guī)則

①出現(xiàn)拖尾峰。方法：采用強(qiáng)極性固定液，去除擔(dān)體活性，提高柱溫解決。②出現(xiàn)平頂形或鋸齒狀峰。通過(guò)減少進(jìn)樣量、提高柱溫和載氣流量等方法解決。此外，當(dāng)放大器輸入飽和時(shí)，也會(huì)形成平。