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全自動核酸提取儀詳細(xì)介紹
全自動核酸提取儀,是運(yùn)用搭配的核苷酸提取實驗試劑來自動進(jìn)行樣版核苷酸的提取工作中的儀器設(shè)備,核酸提取儀分成兩大類:一類是大中型的自動化的,一般稱之為自動液態(tài)工作站;另一類是中小型自動核酸提取儀,利用封裝好的配套設(shè)施實驗試劑自動進(jìn)行提取提純?nèi)^程。大中型自動液態(tài)工作站由于機(jī)器設(shè)備成本費(fèi)昂貴,運(yùn)作成本增加,合適一次提取好幾千個同一類型標(biāo)本采集,因此 真真正正獲得使用的非常少;而中小型自動化的儀器設(shè)備,由于實驗儀器和運(yùn)作低成本,實際操作便捷獲得很多的運(yùn)用。
全自動核酸提取儀分類
根據(jù)儀器型號大小不同劃分
1) 自動液體工作站
自動液體工作站是功能非常強(qiáng)大的設(shè)備,液體分液、吸液等自動完成,甚至能通過整合擴(kuò)增、檢測等功能,實現(xiàn)標(biāo)本提取、擴(kuò)增、檢測全自動化。提取核酸只是其功能的一個應(yīng)用,不太適合常規(guī)實驗室提取核酸,一般都應(yīng)用在單一類標(biāo)本并且一次提取標(biāo)本量非常大(至少96個,一般幾百個)的實驗需求上。自動工作站的平臺建立及平臺的運(yùn)作,需要比較大的資金。
2) 小型自動核酸提取儀
小型的自動化儀器是通過運(yùn)行結(jié)構(gòu)的特殊性來達(dá)到自動提取核酸的目的,可以在任何實驗室得到應(yīng)用。
全自動核酸提取儀——類型介紹
磁珠法自動核酸提取儀又分為磁棒法和抽吸法
先說抽吸法:顧名思義,抽吸法就是通過自動移液裝置來進(jìn)行,通過自動移液裝置來加入裂解液、磁珠吸附;抽走裂解液,加入漂洗液,磁珠吸附,抽走漂洗液,加入洗脫緩沖液。從步驟上好像沒什么問題,但是抽吸法的問題在于,為了在去除廢液的時候不抽走磁珠,移液器不能靠磁珠太近,以防磁珠連同廢液被抽掉,這樣每一次抽廢液的時候總有一小部分不能完全的抽走,特別是磁鐵在底部的裝置,因為磁珠被磁鐵吸附在底部,所以移液器不能靠底部太近,這樣漂洗液就不能完全去除,殘留的漂洗液中的鹽和乙醇會影響后面的洗脫效率和PCR成功率;磁鐵在側(cè)面的裝置殘留的液體會少些,但是洗脫的效率也不好,依靠DNA自行溶解到洗脫緩沖液中,除非等上半小時以上,所以有些96自動核酸提取工作站,提取一輪的時間需要150分鐘,32磁棒法的同樣的時間可以提5輪了。
再說磁棒法核酸提取儀:通量通常有8、16、32、96通道,相對于抽吸法,磁棒法的優(yōu)點(diǎn)是每一步的液體不殘留,因為磁棒只帶走磁珠,轉(zhuǎn)移到下一個步驟相應(yīng)的反應(yīng)孔中,另外選擇磁棒法的提取儀器盡量要功能更齊全的,比如可以加熱,每個加熱槽獨(dú)立溫控,這樣可以設(shè)置加熱、裂解、洗脫的不同溫度,另外很重要的一點(diǎn)是,帶動磁棒的電機(jī)要能帶動磁棒進(jìn)行液體的快速混勻和攪拌,這樣才有利于自動化和有助于裂解和漂洗。磁棒法的通量選擇盡量是32通道,96通道的看似通量更高,但是有個很現(xiàn)實的問題,96個磁力棒在從一個板轉(zhuǎn)移至另外一個板的時候,磁力棒上面的液體中途滴下來怎么辦,它會滴到別的孔中造成污染,而32通道的磁力棒運(yùn)行軌跡不經(jīng)過其他樣本的上空,這樣不會交叉污染。
全自動核酸提取儀的作用
伴隨著分子生物學(xué)技術(shù)性的快速發(fā)展趨勢,以核酸混種雜交、核酸增加及核酸編碼序列剖析等為代表的分子診斷和檢測設(shè)備的關(guān)鍵功效日益突顯。試品前解決所耗費(fèi)的時間段占全部解析流程的60%,而檢驗偏差的90%發(fā)生在前解決行業(yè)。核酸獲取做為分子診斷試驗重要的一步,其得到的核酸品質(zhì)好壞立即危害到中下游分子生物學(xué)實驗的成功與失敗。