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PCR核酸檢測技術(shù)在新冠肺yan疫情檢測中發(fā)揮了重要作用，但由于該技術(shù)將待檢測核酸多次擴(kuò)增，所以非常小污染也容易導(dǎo)致假陽性結(jié)果。PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)中的污染不僅會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量和結(jié)果，還會(huì)危害實(shí)驗(yàn)室工作人員的健康。

PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)完成，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)過程中易發(fā)生污染產(chǎn)生污染主要原因：

① 這也是常見的污染原因。重復(fù)擴(kuò)增后，PCR產(chǎn)物的黏貼遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過PCR的檢測限制，所以即使是少量的污染也足以造成假陽性結(jié)果。

② 試劑的污染。在試劑的配制過程中，接觸了污染的容器、移液器、槍頭、溶液等物導(dǎo)致試劑被污染。

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目前，PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的應(yīng)用得到了快速的發(fā)展，已成為疾病診斷和疫情控制的有力工具。為避免污染和聚合酶鏈反應(yīng)方法中的假陽性和假陰性現(xiàn)象以及保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)嚴(yán)格設(shè)計(jì)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室區(qū)域，明確職能分工，確保實(shí)驗(yàn)室環(huán)境整潔，嚴(yán)格劃分人員和物流，設(shè)計(jì)合理的壓力梯度，形成有序的氣流組織方向，有效避免交叉污染。

避免污染是PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)和設(shè)計(jì)中的首要考慮，由于PCR技術(shù)的高度敏感性，PCR技術(shù)要求高、影響因素多，從樣品制備到結(jié)果的產(chǎn)生，任何一處細(xì)微的失誤均會(huì)造成結(jié)果的偏差，導(dǎo)致樣品的假陽性和假陰性結(jié)果。

在聚合酶鏈反應(yīng)實(shí)驗(yàn)室研究過程中，許多操作都會(huì)產(chǎn)生氣溶膠，如離心和混勻等操作閔。為保證環(huán)境安全，PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建設(shè)需獨(dú)立區(qū)域設(shè)計(jì)，避免與其余環(huán)境的交叉混雜。

PCR實(shí)驗(yàn)室區(qū)域的劃分

1.功能分區(qū)：試劑制備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)一區(qū)、純化區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)二區(qū)和后純化區(qū)

2.設(shè)計(jì)原則

根據(jù)國家衛(wèi)生bu，的要求，實(shí)驗(yàn)區(qū)一定喲啊相互獨(dú)立，不能直接相連。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)有專門的閘間供工作人員換工作服和鞋，進(jìn)入各工作區(qū)域一定要嚴(yán)格遵循單一方向順序，即只能從左邊試劑準(zhǔn)備區(qū)，標(biāo)本制備區(qū)，擴(kuò)增反應(yīng)一區(qū)，純化區(qū)，擴(kuò)增反應(yīng)二區(qū)到后純化區(qū)，避免發(fā)生交叉污染。

3、為避免樣本間的交叉污染，房間采取凈化控制，總體設(shè)計(jì)為10萬級(jí)。閘間(緩沖間)設(shè)計(jì)為正壓區(qū)，保證與外界環(huán)境隔離，避免從鄰近區(qū)域進(jìn)入本區(qū)域的氣溶膠污染。