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山東富舜新材料科技有限公司座落在美麗的“泉城”濟(jì)南。公司是集化學(xué)科研、開發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)為一體的綜合型企業(yè)。測蛋白用的考馬斯亮藍(lán)配方稱取考馬氏亮藍(lán)G250(注意不是R250)50mg,加95%乙醇25ml溶解,加85%磷酸50ml,H2O定容到500ml,過濾去除少量未溶解物。我公司擁有先進(jìn)的生產(chǎn)設(shè)備,完善的產(chǎn)品檢測手段和質(zhì)量保證體系。我公司的員工具有較強(qiáng)的責(zé)任感。經(jīng)過多年的發(fā)展,現(xiàn)已形成添加劑、阻燃劑、和化工助劑三大類上百個品種。公司本著“誠信經(jīng)營、專注品質(zhì)”的宗旨,參與到激烈的市場競爭中來,以好的產(chǎn)品質(zhì)量,優(yōu)惠的產(chǎn)品價格,令人滿意的銷售服務(wù),贏得大家的支持與信賴。山東富舜新材料科技有限公司的誠信、實(shí)力和產(chǎn)品質(zhì)量獲得業(yè)界的認(rèn)可。歡迎各界朋友蒞臨參觀、指導(dǎo)和業(yè)務(wù)洽談。
考馬斯亮藍(lán)G-250法測定蛋白質(zhì)含量的原理是什么
在酸性條件下,考馬斯亮蘭G-250染料與蛋白質(zhì)疏水區(qū)結(jié)合,導(dǎo)致da吸收峰由465 nm 變?yōu)?95 nm,同時顏色也由棕色變?yōu)樗{(lán)色,該藍(lán)色化合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度的高低成正比關(guān)系。亮藍(lán)的制備方法生產(chǎn)方法由鄰磺酸苯j(luò)ia醛與a-(N-乙ji苯氨基)間甲ben磺酸在酸性介質(zhì)中縮合成隱色體。將蛋白質(zhì)樣品或稀釋的BSA 與Bradford試劑混合,測量在595 nm處的吸收值,在建立由一系列稀釋的BSA建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線的情況下,蛋白質(zhì)的濃度可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線而確定。
考馬斯亮藍(lán)G-250(Coomassie brilliant blue G-250)測定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種。在游離狀態(tài)下呈紅色,da光吸收在488nm;當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌?,蛋白質(zhì)-色素結(jié)合物在595nm波長下有da光吸收??捡R斯亮藍(lán)R250染色靈敏度比G250髙得多,但對酸溶蛋白、醇溶蛋白不合適,因?yàn)樵谌旧^程中,蛋白質(zhì)會溶解在染色液或脫色液中。其光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比,因此可用于蛋白質(zhì)的定量測定。蛋白質(zhì)與考馬斯亮藍(lán)G-250結(jié)合在2min左右的時間內(nèi)達(dá)到平衡,完成反應(yīng)十分迅速;其結(jié)合物在室溫下1h內(nèi)保持穩(wěn)定。
該法是1976年Bradford建立,試劑配制簡單,操作簡便快捷,反應(yīng)非常靈敏,靈敏度比Lowry法還高4倍,可測定微克級蛋白質(zhì)含量,測定蛋白質(zhì)濃度范圍為0~1 000μg/mL,xaio可測2.5μg/mL蛋白質(zhì),是一種常用的微量蛋白質(zhì)快速測定方法。生產(chǎn)方法亮藍(lán)的制備由鄰磺基苯j(luò)ia醛與N-乙ji-N-(3-磺基芐基)-苯an縮合,再經(jīng)重鉻suan鈉或二氧化鉛氧化,反應(yīng)結(jié)束后用純堿堿化,再用氯化鈉進(jìn)行鹽析得粗品。
考馬斯亮藍(lán)有G250和R250兩種。其中考馬斯亮藍(lán)G250由于與蛋白質(zhì)的結(jié)合反應(yīng)十分迅速,常用來作為蛋白質(zhì)含量的測定。考馬斯亮藍(lán)R250與蛋白質(zhì)反應(yīng)雖然比較緩慢,但是可以被洗脫下去,所以可以用來對電泳條帶染色。
山東富舜新材料科技有限公司是集化學(xué)科研、開發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)為一體的綜合型企業(yè)。我。經(jīng)過多年的發(fā)展,現(xiàn)已形成添加劑、阻燃劑、和化工助劑三大類上百個品種。歡迎各界朋友蒞臨參觀、指導(dǎo)和業(yè)務(wù)洽談。
亮藍(lán)(Brilliant Blue FCF)別名為食用青色1號(日),是由苯j(luò)ia醛鄰磺酸與N-乙ji,N-(3-磺基芐基)-苯an縮合后氧化,利用現(xiàn)代的生物技術(shù)制成的食用合成色素。亮藍(lán)是一種人工合成食用染料,外觀為紅紫色均勻粉末或顆粒,有金屬光澤,無臭,亮藍(lán)具有酸性染料的特性,能使動物纖維著色。4.按1:5用蒸餾水稀釋濃染料結(jié)合溶液,如出現(xiàn)沉淀,過濾除去。易溶于水(18.7g/100mL,21℃),呈綠光藍(lán)色溶液,溶于乙醇(1.5g/100mL,95%乙醇,21℃)、甘油、丙二醇。耐光、耐熱性強(qiáng)。對檸檬酸、酒石酸、堿均穩(wěn)定、色澤鮮艷、調(diào)色自然、著色力強(qiáng)、色調(diào)不易受PH值影響。
本品為有金屬光澤,帶紅色的紫色粉末或顆粒,無臭味。易溶于水,呈綠色藍(lán)色溶液 ,溶于乙醇、甘油、丙二醇。耐光、耐熱性強(qiáng)。對檸檬酸、酒石酸、堿均穩(wěn)定。
亮藍(lán)運(yùn)用:
依據(jù)在我國《食用添加劑應(yīng)用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(GB2760-1996)中要求:亮藍(lán)可用作果味型飲料(液、固態(tài))、水果汁型飲料、碳酸飲料、配制酒、糖塊、點(diǎn)心上彩裝、紅綠絲、水果罐頭、濃縮汁、青梅、對蝦片,使用量為0.025g/kg;冰激凌,使用量為0.021999g/kg。紅綠絲的使用量可翻倍;果味粉添加劑添加量按稀釋液倍率的50%添加
依據(jù)在我國《食用添加劑應(yīng)用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(GB2760-1996)中要求:亮藍(lán)可用作果味型飲料(液、固態(tài))、水果汁型飲料、碳酸飲料、配制酒、糖塊、點(diǎn)心上彩裝、紅綠絲、水果罐頭、濃縮汁、青梅、對蝦片,使用量為0.025g/kg;冰激凌,使用量為0.021999g/kg。亮藍(lán)為食用藍(lán)色色素,屬于人工合成色素,是由苯j(luò)ia醛鄰磺酸與N-乙ji-N-(3-磺基芐基)-苯an經(jīng)縮合、氧化而制得的。紅綠絲的使用量可翻倍;果味粉添加劑添加量按稀釋液倍率的50%添加