廣州碩譜生物科技有限公司二醇基SPE柱廠家

SPE應(yīng)用 - 水產(chǎn)品中苯并(a)芘的測(cè)定

“苯并(a) 芘”是一種多環(huán)芳香族碳?xì)浠衔?，?duì)人類基因有害，并會(huì)致癌。目前，我國(guó)對(duì)常見(jiàn)食物中苯并芘的限量標(biāo)準(zhǔn)為：肉制品、糧食的食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)為5μg/kg 以下，植物油為10μg/kg 以下，熏烤動(dòng)物性食品為5μg/kg 以下。

GB 5009.27—2011 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯并（a）芘的測(cè)定中，采用去活的氧化鋁層析柱進(jìn)行油脂中苯并（a）芘測(cè)定的前處理，使用溶劑多， 耗時(shí)長(zhǎng)，方法較繁瑣。

本方法采用上海安譜科學(xué)儀器有限公司開(kāi)發(fā)的BAP 苯并(a) 芘 專用 SPE 小柱，克服了國(guó)標(biāo)方法的缺點(diǎn)。

SPE法適用范圍

適用于食品中 PG、THBP、TBHQ、NDGA、BHA、Ionox-100、OG、DG、BHT 九種抗1氧化劑的測(cè)定。

參考標(biāo)準(zhǔn)：

《GB 5009.32-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中9種抗1氧化劑的測(cè)定》

SPE法原理

油樣用乙1腈提取，固相萃取柱凈化。

實(shí)際的應(yīng)用

可以說(shuō)， SPE柱的原理和應(yīng)用相當(dāng)廣泛，今天小編就以乳制品中三聚1氰胺的測(cè)定為例，做了一個(gè)小小的實(shí)驗(yàn)，參考 GB/T 22388-2008原乳及乳制品中三聚1氰胺的測(cè)定方法二[1]。該實(shí)驗(yàn)采用了陽(yáng)離子交換 SPE柱(PCX)，因?yàn)槿?氰胺在化學(xué)結(jié)構(gòu)上有三個(gè)胺基-NH2，因而更容易離子化。

本試驗(yàn)用三聚1氰胺溶液在嬰幼1兒奶粉di一段中加入1.0 mg/kg，經(jīng)處理后在液態(tài)溶液中測(cè)定，多次檢測(cè)結(jié)果為0.8~0.9 mg/kg，經(jīng)過(guò)多次洗滌、淋洗后，多次使用，結(jié)果為0.6~0.7 mg/kg。

正相作用機(jī)理

正相模式是指SPE小柱固定相極性大于流動(dòng)相極性的分離模式。主要是利用：

固相萃取材料極性表面與目標(biāo)物極性官能團(tuán)之間的極性相互作用。極性作用力的強(qiáng)度比非極性作用力要大，但比離子作用力小。常見(jiàn)的極性官能團(tuán)包括羥基、胺基、巰基等。弱極性的基質(zhì)環(huán)境有利于極性作用力的形成，因?yàn)槿鯓O性溶劑沒(méi)有能夠與極性固定相形成氫鍵的官能團(tuán)。因此，在SPE的正相萃取中，樣品基質(zhì)多為弱極性的，如正己烷、二氯甲1烷、菜油等，而目標(biāo)物大多含有極性官能團(tuán)。

到底SPE能不能重復(fù)用

從理論上來(lái)說(shuō)，填料沒(méi)有被破壞的情況下，吸附條件達(dá)到，填料還是可以對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行吸附的，所以小編覺(jué)得二次使用還能吸附并不奇怪。但經(jīng)過(guò)思考，這里有幾個(gè)問(wèn)題：

一，上一個(gè)樣品的目標(biāo)物是否會(huì)殘留到下一個(gè)樣品，影響本底值。

第二，上一個(gè)樣品的雜質(zhì)也是否會(huì)殘留到下一個(gè)樣品，影響基質(zhì)效應(yīng)。

第三，本人操作可能存在一定的偏差。

第四，能不能重復(fù)用還要看di一個(gè)樣品是否很臟，不然過(guò)柱費(fèi)力啊。

第五，也是zui重要的一點(diǎn)，用完一次后，多次洗脫和淋洗，用多了好多的溶劑，而且更關(guān)鍵的是太費(fèi)時(shí)間了，幾個(gè)樣品需要弄好久。

常見(jiàn)的極性固定相有：硅膠，氧化鋁，弗羅里硅土及含有氰基（CN）、氨基（NH2）、二醇基（2OH）的鍵合硅膠。

正相模式下，溶劑體系的極性應(yīng)按照樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序逐漸升高，它們的洗脫強(qiáng)度也逐漸增大。必須保證選擇的樣品溶劑不能將目標(biāo)物洗脫，選擇的淋洗液應(yīng)在不洗脫目標(biāo)物的前提下zui大限度地洗脫干擾物，所以洗脫液應(yīng)能恰好完全洗脫目標(biāo)物。

以下是固相萃取操作中常見(jiàn)的問(wèn)題：

一、回收率低；

二、萃取重現(xiàn)性差；

三、凈化效果不理想；

四、SPE柱流速過(guò)低。

目標(biāo)化合物在吸附劑上保留不足當(dāng)超過(guò)5%的目標(biāo)化合物出現(xiàn)在樣品流出液或淋洗液時(shí)即可斷定“目標(biāo)化合物在吸附劑上的保留不足”。目標(biāo)化合物未被完全洗脫當(dāng)目標(biāo)化合物在樣品溶液流出液和淋洗液中未出現(xiàn)而洗脫液中僅有少量或未出現(xiàn)時(shí)，可判斷“目標(biāo)物未被完全洗脫”。

其他環(huán)節(jié)如果目標(biāo)化合物在洗脫液中正常出現(xiàn)，那么回收率不足的問(wèn)題應(yīng)該來(lái)自樣品前處理的其他環(huán)節(jié)。

氨基柱在進(jìn)酸性樣品時(shí)，很傷柱子，如使用一段時(shí)間后，柱效降低，峰形改變，如何恢復(fù)？

答：氨基柱測(cè)酸性樣品，應(yīng)該是用氨基柱的HILIC模式。酸的存在可能會(huì)使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化，導(dǎo)致使用一段時(shí)間后對(duì)于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。建議：用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0％NH3的乙1腈-水(50:50)溶液沖洗該柱（沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動(dòng)相洗去多余氨），之后再進(jìn)行分析這類酸性分析物時(shí)建議在流動(dòng)相中略微添加少許氨如0.1％。