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怎樣選擇適合你實(shí)驗(yàn)需要的抗體?
(1)確定抗體的名字,注意中英文名字、它名、亞型等信息。
(2)確定你的實(shí)驗(yàn)類(lèi)型,Elisa,WB,IHC,ICC,還是FACS。一般抗體的說(shuō)明書(shū)都會(huì)列出該抗體經(jīng)驗(yàn)證過(guò)適用于何種實(shí)驗(yàn)的類(lèi)型,如果抗體說(shuō)明書(shū)沒(méi)有提及的應(yīng)用類(lèi)型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類(lèi)型,而僅是說(shuō)明尚未經(jīng)過(guò)此種實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,請(qǐng)根據(jù)說(shuō)明書(shū)列出的已驗(yàn)證的類(lèi)型來(lái)選擇適合你實(shí)驗(yàn)的抗體。
(3)確定實(shí)驗(yàn)樣本的種屬,Human,Mouse,還是Rat。一般抗體說(shuō)明書(shū)都列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過(guò)適用于何種物種實(shí)驗(yàn),請(qǐng)根據(jù)說(shuō)明書(shū)列出已驗(yàn)證的種屬來(lái)選擇適合你實(shí)驗(yàn)的抗體。
抗體保存注意事項(xiàng):大部分抗體的運(yùn)輸條件:一般的運(yùn)輸過(guò)程需要1-2 周的時(shí)間,所以是在4 度的條件下來(lái)完成的。4 度運(yùn)輸zui主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害(如果使用干冰運(yùn)輸,那么收到時(shí)抗體是凍起來(lái)的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過(guò)程)。所以運(yùn)輸過(guò)程中避免干冰運(yùn)輸!特殊抗體的保存條件:1. 酶聯(lián)抗體:永遠(yuǎn)保存在4 度,避免凍起來(lái)。否則會(huì)導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失。2. 偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體,對(duì)光極為敏感,因此在所有的實(shí)驗(yàn)階段也是要避光操作的!
細(xì)胞培養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中污染的原因:
1、細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感ran細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯。
2、支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁,原體感ran,國(guó)內(nèi)血清很多都沒(méi)有做支原體陰性檢測(cè),而支原體是牛血清中zui常見(jiàn)的微生物之一。而且它不能用過(guò)濾的辦法除去。支原體gan染細(xì)胞以后,細(xì)胞病變不很明顯,只是慢慢凋亡。