廣州碩譜生物科技有限公司，SPE小柱，是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。硅膠固相萃取柱選擇

在 pH和 pKa相同的情況下，[a]/[HA]為1。這就是說(shuō)，此時(shí)50%弱酸性化合物是陰離子態(tài)，另50%為中性態(tài)。這種 pH環(huán)境下，即使這些呈陰離子狀態(tài)的化合物地被陰離子交換劑吸附，然后地洗脫，也只能得到50%的回收率。由于只有50%的弱酸化合物處于離子狀態(tài)，所以被陰離子交換劑吸附。因此，控制環(huán)境 pH值對(duì)于離子交換固相萃取非常重要。

較弱的酸性化合物離子化的程度越高，代表了較強(qiáng)的[A=[HA]。從理論上講，當(dāng)[A]/[HA]等于100時(shí)，99%的弱酸性化合物都是陰離子，并且能被陰離子交換劑吸附。按照式三，要使弱酸性化合物在陰離子固相萃取吸附時(shí)99%的離子化，樣品基質(zhì)的 pH值應(yīng)高于化合物 pKa至少兩個(gè) pH單位。相反，在對(duì)弱酸性化合物的洗脫過(guò)程中，環(huán)境中的 pH值應(yīng)調(diào)整到低于化合物 pKa的至少兩個(gè) pH單位以下，此時(shí)弱酸性化合物99%是中性狀態(tài)，用適當(dāng)?shù)娜軇年庪x子交換柱洗脫。

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淋洗液如果是水，不進(jìn)行抽干，就會(huì)有一部分被收集到洗脫液中，洗脫液如果進(jìn)行氮吹，則含水的洗脫液也很難進(jìn)行抽干。

如果進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的氮吹，則少量的水溶液會(huì)被吹干，從而導(dǎo)致回收率較低的情況出現(xiàn)，因此淋洗后就需要進(jìn)行抽干操作。

洗脫后會(huì)有部分洗脫溶劑殘留在填料上，填料用量較大時(shí)，洗脫液甚至?xí)埩?~2毫升，使洗脫液不能完全回收，造成回收率低、平行性差。

為確保洗脫的溶劑和目標(biāo)物得到充分回收，還需要對(duì)其進(jìn)行脫水。

廣州碩譜生物科技有限公司，反相SPE柱，是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。硅膠固相萃取柱選擇

對(duì)正相體系，先對(duì)目標(biāo)化合物的正己烷溶液進(jìn)行上樣，然后用5%、10%、20%、30%、40%、60%、70%、80%、90%和的正己烷溶液對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行洗脫，分別收集洗脫液的分析結(jié)果，建立淋洗曲線，確定目標(biāo)化合物洗脫后的溶劑體系，淋洗后的甲1基叔丁基1醚含量應(yīng)略低于目標(biāo)化合物恰好被洗脫時(shí)的溶劑體系，而洗脫液中甲1基叔丁基1醚的含量應(yīng)略高于目標(biāo)化合物正好被洗脫時(shí)的溶劑體系。

合理處理 SPE柱，在 SPE柱中，吸附劑可能存在少量干擾物，有效活化可避免干擾物進(jìn)入洗脫液中，活化溶液應(yīng)選擇整個(gè)洗脫過(guò)程中洗脫強(qiáng)度zui高的溶劑體系。

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樣本制備問(wèn)題

大部分流速問(wèn)題是由于樣品制備不當(dāng)造成的。例如樣品混濁、離心過(guò)濾不充分造成上樣時(shí)篩板堵塞，或樣品本身的蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)處理不當(dāng)，造成有效蛋白沉降，造成篩板堵塞。通過(guò)改進(jìn)前處理方法，可解決由這種原因引起的流速問(wèn)題。因此，樣品準(zhǔn)備是保證 SPE正常流動(dòng)速度的di一步。

小柱子本身因素(填充尺寸和柱子體積)

充填粒徑的作用，大充填粒徑的充填越疏松，流動(dòng)相阻力越小，流速越快；小充填粒徑的作用，充填越緊，流速越慢。這一現(xiàn)象在弗羅里硅土和硅藻土小柱中都很明顯。小柱粒徑范圍一般為40-60 um，農(nóng)殘級(jí)弗羅里硅土的粒徑范圍為75-150 um，大柱粒徑范圍為600-900 um。因此弗羅里硅土和硅藻土小柱的流速會(huì)比一般小柱要快，特別是大孔硅藻土小柱，在使用時(shí)需要配以導(dǎo)流針來(lái)控制流速。

1.在全球市場(chǎng)上，2018年全球色譜柱產(chǎn)量為3785.7千根，比2013年的3096.5千根有所增加，由美國(guó)主導(dǎo)，占全球色譜柱產(chǎn)量的45.90%。作為第二大區(qū)域市場(chǎng)的歐洲，占全球產(chǎn)量的24.23%?，F(xiàn)在主要的色譜柱生產(chǎn)商集中在安捷倫公司，沃特世公司，島津公司，世1界領(lǐng)1先的 ThermoFisher公司，它在2018年的市場(chǎng)占有率為22.01%，位居di一。

2.美國(guó)是色譜柱消費(fèi)zui多的地區(qū)，2018年1448.7千根色譜柱的消費(fèi)量占全球的38.27%，其次是歐洲的29.78%。

三、色譜柱可分為氣相色譜柱、液相色譜柱和 SPE固相萃取小柱，在全球范圍內(nèi)，液相色譜柱的產(chǎn)量占很大比例，2018年為2494千根，占65.88%。其中，氣相色譜柱的產(chǎn)量占24.74%, SPE固相萃取柱的產(chǎn)量占9.38%。

SPE檢測(cè)方法獨(dú)立于分析方法， SPE檢測(cè)方法僅供后續(xù)分析使用。二、為了使樣品溶液與填料充分接觸，溶劑流量不得過(guò)大。三、可以用自動(dòng)化儀器來(lái)完成。該儀器主要由柱架、柱塞泵、貯液槽、管道和處理樣品的處理機(jī)組成。預(yù)柱處理目的：1.去除可能存在于填料中的雜質(zhì)；2.使填料溶出，提高固相萃取的可再生性

建立 SPE方法1.為了防止分析物損失，樣品中的溶劑濃度不宜過(guò)高；2.采用反相萃取法，樣品用水或緩沖劑作溶劑，其中有機(jī)溶1劑含量不超過(guò)10%;3.為克服加樣過(guò)程中分析物損失的問(wèn)題，可采用弱溶劑稀釋樣品，減少樣品體積，增加 SPE柱中的填料，并選擇對(duì)分析物保留較強(qiáng)的吸附劑等措施。

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通常固相萃取柱大多采用聚(PP)為材料的注射針筒裝置，其內(nèi)部裝有兩片塞片，塞片是用聚乙烯(PE)或玻璃纖維制成的，塞片的中間裝有一定量的色譜吸附劑(填料)。固相萃取柱的上端開(kāi)放，下端為出液口，液體通過(guò)吸附劑從出口流出。

按傳統(tǒng)固相萃取柱填料上方的空隙大小可將柱劃分為1 mL,3 mL,6 mL,10 mL,15 mL,20 mL,30 mL,60 mL等規(guī)格。還有根據(jù)特定應(yīng)用要求生產(chǎn)的特殊規(guī)格固相萃取柱。由固相萃取柱的外觀來(lái)看，經(jīng)典的固相萃取柱接近針筒，為直筒型。另一個(gè)固相萃取柱上端為漏斗形，便于人工操作時(shí)一次性裝入更多樣品。

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無(wú)篩平板 SPE柱是一種新型結(jié)構(gòu)的 SPE柱。本品對(duì)C18、C8等鍵合硅膠填料采用奧秘科技工藝進(jìn)行特殊處理，使其具有較高的機(jī)械強(qiáng)度和韌性，不需在柱子上添加聚乙烯多孔擋板。這款神秘秘方技術(shù)產(chǎn)品，“一體式 SPE固相萃取柱[1]”，是國(guó)內(nèi)、外出現(xiàn)一體式 SPE柱。

生產(chǎn)優(yōu)勢(shì)：

無(wú)篩板，避免了由于篩板而產(chǎn)生的“非特異性吸附”。

填料的穩(wěn)定性和固固固性良好，不會(huì)出現(xiàn)普通填料松散等問(wèn)題。

整體填料一體化設(shè)計(jì)，可有效避免“溝槽效應(yīng)”。

可選用粒徑在8-10μ以內(nèi)的填料，大大提高分離效率和載樣量。