RCCS?的原理和優(yōu)勢

     相比動態(tài)和靜態(tài)組織培養(yǎng)系統(tǒng)，RCCS的主要優(yōu)勢是其能提供理想的環(huán)境，從而允許細(xì)胞聚集、3維生長和分化。這個優(yōu)勢使得我們的培養(yǎng)環(huán)境非常接近于體內(nèi)。

在大多數(shù)的動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)中細(xì)胞/組織會受損，這主要是其與推進(jìn)器接觸而致。那么它為何會與推進(jìn)器接觸呢？因?yàn)閼腋。菓腋∈侨绾萎a(chǎn)生的？這歸因于以下2個力：

1.受到推進(jìn)器產(chǎn)生的力；

2.在培養(yǎng)的氧交換和懸浮過程中噴出的氣泡所產(chǎn)生的 剪切力。

     在靜態(tài)的平面培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿中，2維的環(huán)境和塑料基質(zhì)會改變基因表達(dá)和阻止分化。 相比之下，在RCCS?中生長的細(xì)胞/組織因隨機(jī)變化的重力矢量而懸浮，從而在培養(yǎng)液中成連續(xù)的自由落體狀態(tài)。一個較好的比喻是：細(xì)胞從無限高的充滿液體的管中落下。組織在培養(yǎng)液中會落下、翻滾和混合，受不到任何主宰生長方向的單個重力矢量的影響；組織會向各個方向生長。這就是RCCS?的機(jī)制。

     由于系統(tǒng)無推進(jìn)器、空氣升液器、氣泡或攪拌器，使破壞性應(yīng)力減到1小。因維持在一個理想的流體軌道中，故細(xì)胞能共同生長、互相交流和形成3維的結(jié)構(gòu)。

此外，RCCS?是目前唯1的能使研究者進(jìn)行共同培養(yǎng)，而這種培養(yǎng)能提供本能的分化、高細(xì)胞增殖、低的細(xì)胞率和增加細(xì)胞產(chǎn)物的分泌。

污染途徑 污染物，特別是微生物常通過下列途徑進(jìn)入培養(yǎng)體系，造成污染

1、空氣：空氣是微生物及塵埃顆粒傳播的主要途徑。空氣流動性大，如果培養(yǎng)操作場地于外界隔離不嚴(yán)格或消毒不充分，外界不潔空氣很容易進(jìn)入造成污染。因此，培養(yǎng)設(shè)施不能設(shè)在通風(fēng)場所。無菌操作應(yīng)在凈化臺內(nèi)進(jìn)行，工作時要帶口罩，以免因講話、咳嗽等使外界污染進(jìn)入操作面，造成污染。

2、器材：各種培養(yǎng)器皿、器械消毒不徹底和洗刷不干凈導(dǎo)致污染，另外需要對培養(yǎng)箱進(jìn)行定期消毒，防止形成污染

3、操作：實(shí)驗(yàn)操作無菌觀念不強(qiáng)，技術(shù)不熟練，使用污染的器皿或封瓶不嚴(yán)等，都可以造成污染。培養(yǎng)兩種細(xì)胞以上時，操作不規(guī)范，交叉使用吸管或培養(yǎng)液、瓶等有可能導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。

4、血1清：有些血1清在生產(chǎn)時就已經(jīng)被支原體或病毒等污染，變成了污染。

5、組織樣本：原代培養(yǎng)的污染多數(shù)來源于組織樣本；取材時碘酒消毒后脫碘不徹底，可造成碘混入組織，細(xì)胞或培養(yǎng)液中，影響細(xì)胞細(xì)胞生長。

RCCS將細(xì)胞研究帶入更多元化、更進(jìn)一步的領(lǐng)域?

       RCCS 將細(xì)胞研究帶入更多元化、更進(jìn)一步的領(lǐng)域，應(yīng)用范圍十分廣泛，無論在學(xué)術(shù)研究或臨床研究上都有相當(dāng)?shù)膽?yīng)用價值。無論是培養(yǎng)人體組織以進(jìn)行治1療的研究，或是培養(yǎng)替代的組織，進(jìn)行再生醫(yī)學(xué)及細(xì)胞治1療，例如肝1臟、皮膚、骨1髓、、心肌、肺或其他組織等，均提供了ZU佳的研究系統(tǒng)，以達(dá)到接近體內(nèi)環(huán)境的條件?？茖W(xué)家更可利用此系統(tǒng)進(jìn)行腫1瘤細(xì)胞、病毒或其他可生產(chǎn)蛋白質(zhì)、酵素、荷爾1蒙、抗原或抗1體等重要物質(zhì)的細(xì)胞的培養(yǎng)。 RCCS 這樣的系統(tǒng)還提供了 ex vivo 培養(yǎng)環(huán)境，研究者可利用 RCCS 以探討微環(huán)境因子，對細(xì)胞分化和功能的影響。

細(xì)胞周期檢測技術(shù)

細(xì)胞周期指由細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次細(xì)胞分裂結(jié)束所經(jīng)歷的過程，所需的時間叫細(xì)胞周期時間。

常用的方法：流式檢測細(xì)胞周期，標(biāo)記有絲分裂百分率法。

細(xì)胞凋亡檢測

常見檢測方法：流式檢測細(xì)胞凋亡，線粒體膜電位，活性氧檢測，Hoechst染色，電鏡，TUNEL。

細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力檢測

常見檢測方法：細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)，Transwell實(shí)驗(yàn)，Invasion實(shí)驗(yàn)

其他實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞程度：軟瓊脂實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞屏障：跨膜電阻、熒光黃透過率

細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)

共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)