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以下列出了一些色譜柱的清洗溶劑和順序，作為參考：以正已烷(或庚烷)、和的硅膠柱依次沖洗，然后按相反的順序沖洗，所有的溶劑必須嚴(yán)格脫水。可以清洗掉殘留的強(qiáng)極性雜質(zhì)，并對(duì)硅膠表面進(jìn)行活化。反相柱用水、、、(或)依次沖洗，然后按反序沖洗。若下一步分析所用的流動(dòng)相不含緩沖液，就可以忽略一步用水沖洗?？上慈埩舻姆菢O性雜質(zhì)，多次在()沖洗時(shí)多次注射100-200μ l四氫，有助于去除強(qiáng)疏水性的雜質(zhì)。四氫與或混合溶液可去除類脂。有時(shí)候還要注射幾次二甲砜。用0.1%的、、三梯度洗脫可去除蛋白質(zhì)污染。用稀酸緩沖洗陽離子交換柱，用稀堿緩沖液沖洗，把交換性能很強(qiáng)的鹽去掉，再用水、、(除去固定相表面吸附的有機(jī)物)、、水，依次沖洗。

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保存色譜柱時(shí)，柱中應(yīng)充滿或，柱連接處應(yīng)緊固，防止溶劑揮發(fā)干燥。請(qǐng)勿將緩沖液留在柱內(nèi)待一夜或更久。8、在使用色譜柱時(shí)，如果壓力升高，有一種可能是燒結(jié)過的濾片被堵塞，此時(shí)應(yīng)更換濾片或取出清洗；還有一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi)，使柱頭受到污染；如果柱效降低或色譜峰變形，可能會(huì)出現(xiàn)柱頭塌陷，體積增大。當(dāng)出現(xiàn)后兩種情況時(shí)，小心將柱頭接頭擰開，用潔凈的小鋼將柱頭填料取出1~2 mm的高度(注意將污染的填料取凈)再將柱內(nèi)填料整平。接著將其填充到色譜柱中，用合適的溶劑潤濕固定相(與柱相同)，壓平，然后擰緊柱接頭。這種處理后柱的效能有所提高，但難以恢復(fù)到新柱水平。柱失效一般為柱端，在分析柱前安裝與分析柱相同固定相的短柱(5-30毫米)，可起到保護(hù)、延長柱壽命的作用。使用保護(hù)柱會(huì)失去一些柱效，這是值得的。

應(yīng)用過程中的液相色譜四個(gè)關(guān)鍵因素1、液相色譜儀本身：通常儀器本身是沒有問題的，尤其是新買回來的儀器。就儀器本身而言，重要的是儀器的檢驗(yàn)，新買回來的儀器一般都是由賣方先對(duì)儀器做系統(tǒng)的確認(rèn)工作(包括 IQ、 PQ、 OQ)，確認(rèn)順利通過后，再請(qǐng)國家或省級(jí)儀器檢定局的來校驗(yàn)，檢定合格后再用，檢定合格后再用，除此之外，還可以放心使用，此外，還可為儀器的正常使用提供保障。2、色譜條件：通常的色譜條件包括流動(dòng)相、色譜柱、檢測波長、流速和進(jìn)樣量。移動(dòng)相是指在制備流動(dòng)相所用水和試劑試液時(shí)，水的電阻率一般不超過18.2兆歐，而水的電阻率不超過18.2兆歐，其原因是為了防止水和試劑試液中雜質(zhì)對(duì)色譜結(jié)果的干擾，測試液采用色譜級(jí)別。

③先用溶劑將檢測池沖洗，具體用哪種具體的試樣而定；若沖了還不行，把檢測池卸下來，看燈能量，若能量還可以(有個(gè)幾千)，可能得清洗光路。首先還是請(qǐng)工程師來清洗，因?yàn)橐謇淼牧慵谔綔y器下面有一個(gè)黑色的碎片，中間有一條縫，而且那一塊的螺絲都是八角的，卸起來很麻煩。④拿出5個(gè)樣品盤，可以看到里面有一個(gè)黑色凸起(看不清是用電筒)，平時(shí)進(jìn)樣針就是從那個(gè)地方吸的。伸手就能卸下來，里面有一個(gè)小白圈(用多了自然就黑了)，換一個(gè)新的就好了，一般只有10個(gè)才能買儀器。

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峰丟失的故障

導(dǎo)致漏峰的原因主要有兩種：一是氣路中的污染，二是氣路未分離。

情況可以通過多次空轉(zhuǎn)和清洗氣路(進(jìn)樣口、檢測器等)來解決。

1、為減少對(duì)氣路的污染，可采取如下措施：程序升溫后階段，應(yīng)進(jìn)行高溫清洗；

2、樣品進(jìn)樣應(yīng)保持清潔；

3、減少使用高沸點(diǎn)油類物質(zhì)；

4、采用盡可能高的進(jìn)樣口溫度、柱溫和檢測器溫度。

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峰丟失的第二種情況是峰未分開，除上述原因外，還有可能是由于系統(tǒng)污染引起的柱效下降或柱子老化引起，而柱子的老化所造成的峰損失則是漸進(jìn)的、緩慢的。

系統(tǒng)污染和漏氣是造成假峰現(xiàn)象的主要原因，通過檢查漏氣、除污等措施加以解決。日常工作中應(yīng)記錄正常時(shí)基線的情況，以便維修時(shí)參考。

不完全分離

①一些峰相重疊，不能分開。治理措施：降低載風(fēng)量，減少進(jìn)樣量，降低柱溫。對(duì)能原能完全分離，用一段時(shí)間后便不能完全分離，說明固定液流失了，柱子壽命已長，需要更換固定液。②過長的分離時(shí)間導(dǎo)致晚餾出的峰變平。處置：可通過升高柱溫來解決。③檢測器靈敏度太低，無法檢測含有少量成分的成分。解決辦法：可增加進(jìn)樣量，提高檢測器靈敏度等方法。

五峰形不規(guī)則

①出現(xiàn)拖尾峰。方法：采用強(qiáng)極性固定液，去除擔(dān)體活性，提高柱溫解決。②出現(xiàn)平頂形或鋸齒狀峰。通過減少進(jìn)樣量、提高柱溫和載氣流量等方法解決。此外，當(dāng)放大器輸入飽和時(shí)，也會(huì)形成平。