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細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,應該仔細觀察每種細胞的狀態(tài),抱團并不一定代表不好:1,若細胞輪廓清晰,可看清楚一個個的細胞,像葡萄一樣,一串串的,就是狀態(tài)好的,說明細胞在分裂。2,但大部分細胞抱團不是一件好事!如果輪廓消失,出現(xiàn)細胞融解或細胞變灰暗、透光性變差,就是細胞死了。葡萄狀和抱團,在鏡下其實很容易區(qū)別。抱團死的細胞可以看到細胞碎片。
于基因治的臨床級逆轉錄病毒載體生產已經應用于一些病癥,這種病毒載體修飾體細胞需要具有基因穩(wěn)定性。γ逆轉錄病毒載體是首應用于治嚴重聯(lián)合免缺陷患者。如今,基于更加復雜的慢病毒設計的其他逆轉錄病毒基因轉導載體,如人缺陷病毒(HIV)-1,已經在臨床上用于治遺傳性疾病或HIV染。慢病毒載體(LV)提供了許多有價值的特性,包括穩(wěn)定的將基因整合到宿主基因組中,通過VSV-G假型分型將遺傳信息轉移到分裂和非分裂細胞以及廣泛的組織能力。
在生物反應器中生產需要對懸浮的生產細胞擴大培養(yǎng)。多個用于生產慢病毒的細胞系(293T、293FT、293SF-3F6)被報道易于在化學成分限定的培養(yǎng)基(Freestyle 293 and F17, Invitrogen, Carlsbad, CA; HyQSFM4TransFx293, Hyclone, Logan, UT)中適應懸浮培養(yǎng)。這些細胞可以在沒有為載體的情況下迅速懸浮生長,這使得它們的培養(yǎng)和擴大比貼壁培養(yǎng)的細胞容易很多。此外,培養(yǎng)基中沒有其他動物來源的組分是臨床生產合適的情況,它可以降低被外源物質污染的風險。