熒光光譜特點

靈敏度更高  g/ml，應用不如UV廣泛。應用：①直接熒光光度法②作為HPLC的檢測器（用的多）根據(jù)物質(zhì)分子吸收光譜和熒光光譜能級躍遷機理，具有吸收光子能力的物質(zhì)在特定波長光（如紫外光）照射下可在瞬間發(fā)射出比激發(fā)光波長長的光，即熒光。 分子受特定光照射后處于激發(fā)態(tài)的 分子返回基態(tài)時發(fā)出熒光, 其熒光強度與 呈線性關系, 從而可測出氣體濃度。當檢測儀器系統(tǒng)確定后，熒光總光強I與 濃度的之間的關系可表示為：I=KC在穩(wěn)定的條件下，這些參數(shù)也隨之確定，k可視為常數(shù)。因此，式中I=kC表示的紫外熒光光強I與樣氣的濃度C成線性關系。這是紫外熒光法進行定量檢測的重要依據(jù)。

熒光光譜定量分析

在低濃度時，溶液的熒光強度與熒光物質(zhì)的濃度成正比：F=Kc。其中，F(xiàn)為熒光強度，c為熒光物質(zhì)濃度，K為比例系數(shù)。這就是熒光光譜定量分析的依據(jù)。

上述關系不適用于熒光物質(zhì)濃度過高時，熒光物質(zhì)濃度過高，其熒光強度反而降低。原因有：

（1）內(nèi)濾效應。一是，當溶液濃度過高時，溶液中雜質(zhì)對入射光的吸收作用增大，相當于降低了激發(fā)光的強度。二是，濃度過高時，入射光被液池前部的熒光物質(zhì)強烈吸收，處于液池中、后部的熒光物質(zhì)，則因受到入射光大大減弱而使熒光強度大大降低；而儀器的探測窗口通常對準液池中部，從而導致檢測到的熒光強度大大降低。

（2）相互作用。較高濃度溶液中，可發(fā)生溶質(zhì)間的相互作用，產(chǎn)生熒光物質(zhì)的激發(fā)態(tài)分子與其基態(tài)分子的二聚物或其他溶質(zhì)分子的復合物，從而導致熒光光譜的改變和/或熒光強度下降。當濃度更大時，甚至會形成熒光物質(zhì)的基態(tài)分子聚集體，導致熒光強度更嚴重下降。

（3）自淬滅。熒光物質(zhì)的發(fā)射光譜與其吸收光譜呈現(xiàn)重疊，便可能發(fā)生所發(fā)射的熒光被部分再吸收的現(xiàn)象，導致熒光強度下降。溶液濃度增大時會促使再吸收現(xiàn)象加劇。

當然，熒光強度的影響因素還有溶劑、溫度、pH值、散射光等，在定量分析中需要加以考慮。

熒光光譜定量分析的計算與其他光譜類似，包括標準曲線法、比例法等。

原子熒光光譜儀

原子熒光光度計利用惰性氣體氣作載氣，將氣態(tài)氫化物和過量氫氣與載氣混合后，導入加熱的原子化裝置，氫氣和氣在火焰裝置中燃燒加熱，氫化物受熱以后迅速分解，被測元素離解為基態(tài)原子蒸氣，其基態(tài)原子的量比單純加熱、銻、鉍、錫、硒、碲、鉛、鍺等元素生成的基態(tài)原子高幾個數(shù)量級。原子熒光分析儀分非色散型原子熒光分析儀與色散型原子熒光分析儀。這兩類儀器的結構基本相似，差別在于單色器部分。