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擴(kuò)增檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室原則上分為4個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域:試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。為避免交叉污染,進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行。
雖然這些污染對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響已經(jīng)受到了廣泛重視,多數(shù)實(shí)驗(yàn)室對(duì)污染控制都采取了各種辦法,比如定期大掃除清理、劃分操作區(qū)域、試劑分裝、操作謹(jǐn)慎、重復(fù)實(shí)驗(yàn)、多角度驗(yàn)證結(jié)果。但是微量的核酸片段就能被擴(kuò)增,所以對(duì)污染物的控制不僅僅是做到這些就能夠杜絕和避免的,關(guān)鍵是需要從源頭控制。
脈動(dòng)真空滅菌器在使用時(shí),很多人疏忽了在設(shè)備運(yùn)行過程前的檢查。脈動(dòng)真空滅菌器運(yùn)行前的備用狀態(tài)如下所示:
球磨機(jī)正常運(yùn)行時(shí)鋼球與鋼球、鋼球與礦石、鋼球與球磨機(jī)襯板之間產(chǎn)生的合理磨擦,會(huì)使磨耗增大,使大球磨小、中球磨為小球。所以平時(shí)正常情況下,不需要再加小球。
球磨機(jī)鋼球配比要根據(jù)磨機(jī)有效長(zhǎng)度,是否帶輥壓機(jī),進(jìn)料粒度多大,用的什么襯板及結(jié)構(gòu),預(yù)想的篩余細(xì)度和比表,用多少鉻的球,轉(zhuǎn)速多少等因素綜合判斷。
數(shù)據(jù)分析軟件:這是NGS實(shí)驗(yàn)室特有的環(huán)節(jié),實(shí)驗(yàn)室需要用商品試劑配套的軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,并確認(rèn)使用軟件的版本和數(shù)據(jù)庫(kù)的現(xiàn)行有效版本;數(shù)據(jù)需要專業(yè)的生信人員進(jìn)行分析,需要在數(shù)據(jù)預(yù)處理、數(shù)據(jù)比對(duì)、數(shù)據(jù)質(zhì)控、分析判斷等每個(gè)流程進(jìn)行質(zhì)控,確保數(shù)據(jù)分析的準(zhǔn)確性。檢查人員強(qiáng)調(diào),實(shí)驗(yàn)室安全關(guān)系到全監(jiān)測(cè)站每一位職工的安全,特別是有毒有害試劑的存放管理要嚴(yán)格、規(guī)范,有毒有害試劑的泄漏、流出和使用不當(dāng)均會(huì)帶來不可估計(jì)的損失,要做到“全覆蓋、零容忍”,堅(jiān)決杜絕有毒有害試劑事故的發(fā)生,確保職工的人身財(cái)產(chǎn)安全,維護(hù)單位工作環(huán)境和諧穩(wěn)定。